Sodium benzoate в зубной пасте: какими можно пользоваться? • ImOrganic

Содержание

Состав средств для зубов Colgate®

Paraffinum Liquidum (вазелиновое масло)

Используется для смешивания ингредиентов

PEG-12 (полиэтиленгликоль-12)

Придает нашим средствам необходимую консистенцию

PEG-40 Castor Oil (полиэтиленгликоль-40 касторовое масло)

Предотвращает разделение жидкостей в средствах

 

PEG/PPG-116/66 Copolymer (сополимер полиэтиленгликоля/полипропиленгликоля-116/66)

Придает нашим средствам необходимую консистенцию

 

Pentasodium Triphosphate (пятизамещённый трифосфат натрия)

Помогает защитить зубы от аккумуляции загрязнений

 

Phosphoric Acid (фосфорная кислота)

Помогает добиться идеального водородного показателя

Poloxamer 338 (полоксамер 338)

Предотвращает разделение жидкостей

Poloxamer 407 (полоксамер 407)

Предотвращает разделение средств на компоненты

Polyethylene (полиэтилен)

Загущает средства, придавая им нужную консистенцию

Polysorbate 20 (полисорбат 20)

Используется для смешивания ингредиентов

Potassium Nitrate (нитрат калия)

Помогает бороться с гиперчувствительностью зубов

Potassium Sorbate (сорбат калия)

Помогает защитить наши средства от бактерий, грибка и плесени

Propylene Glycol (пропиленгликоль)

Предотвращает разделение жидкостей

PVM/MA Copolymer (сополимер поливинил метилового эфира и малеинового ангидрида)

Помогает активным ингредиентам удерживаться на зубах и деснах

 

PVP (поливинилпирролидон)

Загущает средства, придавая им нужную консистенцию

О продукте
Зубная паста Une piscine a Antibes — это вкус лакрицы. (без содержания фтора)

Франция, 25 / 75 мл

Артикул: KL_LE024CF

Подробнее

Коллекция органических зубных паст LEBON изготовлена из этичных, натуральных и органических ингредиентов. Зубная паста Une piscine a Antibes — это вкус лакрицы, сладкой, как солнечный летний день, и мяты, которая дарит ощущение свежести, будто погружение в бассейн! Источником вдохновения послужила красота бассейна исторического отеля Cap-Eden-Roc в Антибе.

Способ применения

Используйте небольшое количество зубной пасты 2 раза в день, утром и вечером. Для максимального эффекта чистите зубы не менее 2-3 минуты. После используйте ополаскиватель.

Состав продукта

Dicalcium Phosphate Dihydrate, Glycerin, Water (Aqua), Aroma, Lauryl Glucoside, Hydrated Silica, Cellulose Gum, Citric Acid, Potassium Sorbate, Sodium Benzoate, Stevia Rebaudiana Extract, Camellia Sinensis (Green Tea) Leaf Water, Limonene*, Benzyl Alcohol*, Cinnamal*, Eugenol*, Aloe Barbadensis Leaf Extract. * From Natural Essential Oils

Информация о доставке

Доставим этот товар в салоны KEEP LOOKING или по удобному адресу в России, Беларуси, Казахстане и Армении. Заказы от 7.000₽ отправляем по РФ бесплатно.

Паста зубная «Интенсивное отбеливание» Synergetic с бесплатной доставкой на дом из «ВкусВилл»

Натуральная зубная паста для интенсивного отбеливания SYNERGETIC со вкусом «КОКОС + МЯТА» – безопасная и эффективная паста без фтора, которая расщепляет и удаляет белковую основу окрашенного налета и активно осветляет эмаль. Активные компоненты в этой зубной пасте ― эффективные и безопасные папаин, цитрат цинка и экстракт лимона. Улучшает обменные процессы и восстанавливают здоровье десен. Высокая концентрация натуральных компонентов оказывает общий тонизирующий и противовоспалительный эффект. Абразивы нового поколения содержат частицы сферической формы, не повреждающие зубную эмаль. В качестве ПАВ используется лаурилсаркозинат натрия — биоразлагаемый экологичный компонент с отличными пенообразующими и чистящими свойствами. Не содержит мела, фтора, SLS, SLES, парабенов, триклозана и диоксида титана.

194 руб / шт 194 194

Выбрать
любимым Выбран
любимым

Состав: Sorbitol, Silica, Aqua, Glycerin, Sodium Lauroyl Sarcosinate, Xylitol, Calcium Lactate, Zinc Citrate, Acorus Calamus (Sweet Flag) Root Extract, Citrus Limonium Extract, Aroma, Xanthan Gum, Stevioside, Papain, Sodium Benzoate, Рotassium Sorbate, Menthol, Hydrates Silica Plus Pigment, O-Cymen-5-ol, Bisabolol, Vitamin Premix (Tocopherol (Vitamin E), Thiamine (Vitamin B1), Riboflavin (Vitamin B2), Niacinamide, Pantothenic Acid, Pyridoxine (Vitamin B6), Cyanocobalamin (Vitamin B12), Ascorbic Acid (Vitamin C), Folic Acid (Vitamin B9), Biotin, Maltodextrin), Retinyl Palmitate (Vitamin A Palmitate). Информация на этикетке может незначительно отличаться Данный товар поставляют несколько производителей, внешний вид и характеристики могут незначительно отличаться. Актуальные данные указаны на этикетке. Цена может отличаться в зависимости от региона или формата точки продажи (вендинг, микромаркет).

Описание: Натуральная зубная паста для интенсивного отбеливания SYNERGETIC со вкусом «КОКОС + МЯТА» – безопасная и эффективная паста без фтора, которая расщепляет и удаляет белковую основу окрашенного налета и активно осветляет эмаль. Активные компоненты в этой зубной пасте ― эффективные и безопасные папаин, цитрат цинка и экстракт лимона. Улучшает обменные процессы и восстанавливают здоровье десен. Высокая концентрация натуральных компонентов оказывает общий тонизирующий и противовоспалительный эффект. Абразивы нового поколения содержат частицы сферической формы, не повреждающие зубную эмаль. В качестве ПАВ используется лаурилсаркозинат натрия — биоразлагаемый экологичный компонент с отличными пенообразующими и чистящими свойствами. Не содержит мела, фтора, SLS, SLES, парабенов, триклозана и диоксида титана.

  • Годен: 730 суток
  • Вес/объем: 1 шт

Lapikka зубная паста Сенситив для чувствительных зубов (94 гр)

Код товара:
4062

150

Скоро в продаже

Минимальная сумма заказа:
1 000 руб

Штрих-код: 4607034474140

Описание
  • Состав/ingredients:
  • Aqua, Silica, Sorbitol, Glycerin, Potassium Chloride, Xylitol, Cocamidopropyl Betaine, Sodium Lauroyl Sarcosinate, Xanthan Gum, Hydroxyacetophenone, Aroma, Sodium Saccharin, Sodium Benzoate, Potassium Sorbate, Laminaria Saccharina Salt, Calcium Glycerophosphate, Magnesium Chloride, O-cymen-5-ol, Benzyl Benzoate, Limonene. 

Зубная паста Сенситив для чувствительных зубов фирмы Lapikka станет верным помощником для комфортного ухода за ротовой полостью. Регулярная гигиена позволяет насыщать эмаль глицерофосфатом натрия и хлоридом калия, поэтому при очистке зубов не будет неприятных ощущений. Заказать пасту стоит и тем, кто любит все натуральное. В составе пасты не значатся вредные составляющие, такие как спирт, парабены, фтор, красители и другие. Средство отлично справляется с главными задачами, не давая развиваться кариесу.

Достоинства зубной пасты Сенситив Lapikka:

  • Подходит при чувствительной эмали.
  • Эффективное удаление налета с зубного ряда.
  • В составе есть био-кальций и натуральные компоненты.
  • Длительно освежает ротовую полость.
  • Выгодная цена.
  • Насыщение эмали необходимыми элементами.
  • Снятие болевого синдрома.

Фирменную пасту Lapikka рекомендуется купить тем людям, которые склонны иметь проблемы с чувствительностью эмали. Необходимые компоненты помогут убрать неприятные ощущения.

Показать все описание Характеристики

RDA (индекс абразивности)

Вкус

освежающий

Возрастная категория

12+

Лаурилсульфат натрия

отсутствует

Монофторфосфат натрия

отсутствует

Особенности

натуральные ингредиенты

Страна производителя

Россия

Страна производства

Россия

Тип

для чувствительных десен

Фторид натрия

отсутствует

Посмотреть все характеристики Свернуть характеристики

Отзывы

Здоровье десен – Материалы для стоматологов

Поддержка в улучшении качества очищения зубов ваших пациентов

Профилактика заболеваний десен в домашних условиях требует строгого соблюдения выполнения рутинных (ежедневных) мероприятий, но это легче сказать, чем сделать. Пациентам сложно соблюдать этот распорядок каждый день, особенно в случае с труднодоступными участками полости рта.

И все же перемены возможны. Итак, что делает parodontax вашим союзником в вопросах чистки зубов?

Зубная паста parodontax – это уникальный состав, содержащий бикарбонат натрия, оптимизированный до концентрации 67%. Что это значит для здоровья десен ваших пациентов?

Бикарбонат натрия проникает в матрицу зубной бляшки, где он разрывает и разрушает связи в биопленке, ослабляя налет.1-3  В результате этого parodontax размягчает зубной налет на поверхности зуба, что облегчает его удаление.1,3,4 Это означает, что зубная паста с бикарбонатом натрия в 4 раза уменьшает образование зубного налета по сравнению с зубными пастами без натрия бикарбоната.*5

Более того, зубная паста parodontax смягчает зубной налет в межзубных промежутках, уменьшая его в пять раз больше, чем зубная паста без бикарбоната натрия труднодоступных местах.*2

А как это влияет на гингивит? При использовании parodontax отмечается примерно в 2,5 раза меньше очагов кровоточивости, чем при использовании зубных паст без натрия бикарбоната.*3

Это приводит к значительному различию, которое помогает вам и вашим пациентам принимать меры по борьбе с гингивитом, помогая предотвратить прогрессирование этого заболевания до пародонтита – все это подтверждается опубликованными клиническими данными.3

Рекомендуйте зубную пасту parodontax сегодня, чтобы узнать, как вместе мы можем сделать все возможное, чтобы положительно повлиять на здоровье десен ваших пациентов!

Что такое бензоат натрия? Безопасен ли он для использования в качестве пищевого консерванта?

Бензоат натрия используется в качестве консерванта для предотвращения плесневения пищевых продуктов. Это помогает сохранить наши продукты стабильными при хранении в течение как минимум двух лет с даты покупки и используется в концентрациях менее 0,5% по объему.

Хотя бензоат натрия считается безопасным, ученые показали, что при его смешивании с аскорбиновой кислотой (витамином С) возникают негативные побочные эффекты. Их исследования показывают, что затем он превращается в бензол, известный канцероген, который может вызывать рак.

Применение бензоата натрия

Пищевые продукты. В пищевой промышленности бензоат натрия используется для предотвращения порчи от вредных бактерий, дрожжей и плесени. Он также помогает сохранить свежесть пищи, помогая замедлить или предотвратить изменения цвета, вкуса, рН и текстуры.

Другие продукты, которые обычно включают в себя бензоат натрия, включают в себя:

  • Салатные повязки
  • соленья
  • Sauces
  • Condiments
  • Фруктовые соки
  • Вина
  • Закуска

Выпить. Бензоат натрия используется в качестве консерванта в безалкогольных напитках для повышения кислотности вкуса и в качестве консерванта для продления срока годности.

Кока-Кола. Бензоат натрия, бензоат калия и сорбат калия являются тремя распространенными консервантами в напитке Coca-Cola. Бензоат натрия используется для защиты вкуса и в качестве антимикробного агента. Кроме того, мы обычно можем найти бензоат натрия в списках ингредиентов Fanta и Sprite.

ПепсиКо. Бензоат натрия также используется для сохранения свежести газированных безалкогольных напитков Pepsi. Тем не менее, он меньше используется в популярных газированных напитках PepsiCo, Diet Pepsi и Pepsi, в которых бензоат калия используется в качестве основного консерванта.

Косметика. Как продукты питания и напитки, косметика также нуждается в консервантах, чтобы предотвратить рост бактерий. Натуральные продукты без консервантов не могут долго храниться.

Средства личной гигиены. бензоат натрия можно использовать в качестве антикоррозийного и консерванта в большом разнообразии продуктов личной гигиены, таких как:

  • рта для полоскания рта
  • продукты для волос
  • солнцезащитный крем
  • Mosturizers
  • Serums
  • Baby Wipes

зубная паста . Для подавления роста микроорганизмов в зубную пасту производители обычно добавляют определенное количество консервантов. С точки зрения антимикробного эффекта, безопасности и цены бензоат натрия часто является лучшим выбором по сравнению с другими обычно используемыми консервантами в зубной пасте.

Фармацевтические препараты. Бензоат натрия также может использоваться в фармацевтических продуктах из-за его антимикробных свойств, например, в составе таблеток, капсул и сиропа от кашля.

Безопасен ли бензоат натрия?

Бензоат натрия общепризнан безопасным и может использоваться в качестве противомикробного агента и ароматизатора в пищевых продуктах с максимальным использованием 0.1%. Он также признан безопасным (GRAS) при использовании в качестве консерванта в кормах.

FDA считает максимально допустимым уровнем содержания бензоата натрия в питьевой воде 5 частей на миллиард. Почти все напитки находятся под этим номером и не представляют угрозы для нашего здоровья.

Многие покупатели обеспокоены консервантами, такими как бензоат натрия. Принято считать, что бензоат натрия вреден для здоровья и имеет несколько побочных эффектов.

Рак . Когда бензоат натрия смешивается с витамином С — что содержится в некоторых безалкогольных и других напитках — и подвергается воздействию повышенных температур или света, может образовываться вызывающий рак химический бензол.

Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) не публиковало более поздние анализы продуктов, но заявило, что низкий уровень бензола в напитках не представляет опасности для здоровья. До сих пор отсутствуют долгосрочные исследования, оценивающие взаимосвязь между регулярным употреблением низких доз бензола и риском развития рака.

Беременность. Обычно считается безопасным во время беременности, но перед использованием продуктов с бензоатом натрия лучше проконсультироваться с врачом.

Аллергии. Небольшой процент людей может быть гиперчувствительным к консервантам, таким как бензоат натрия, и могут испытывать следующие аллергические симптомы:

  • Эпидемиологически значимые (зуд и отек)
  • Периоральная контактная крапивница (раздражение кожи, подобное розацеа)
  • Зуд (неприятные позывы поцарапать)

СДВГ. Люди, которые пили напитки с высоким содержанием бензоата натрия, такие как газированные напитки, сообщали об увеличении симптомов синдрома дефицита внимания/гиперактивности (СДВГ).

Воспаление. Исследование, проведенное в 2012 году, показало, что консерванты, такие как бензоат натрия, в продуктах питания и напитках могут привести к вялотекущему воспалению в организме. Этот тип слабовыраженного воспаления может быть хроническим у людей с ожирением.

Альтернативы потреблению бензоата натрия

По данным FDA, если вы обеспокоены воздействием бензола, избегайте покупки безалкогольных напитков, в которых указаны как бензоат натрия, так и аскорбиновая кислота или ее химический аналог, эриторбиновая кислота.

Если вам трудно полностью избежать воздействия бензола, вы можете ограничить его воздействие, придерживаясь:

  • Свежие фрукты
  • Овощи (не маринованные)
  • Выжатый фруктовый сок
  • Вода

Нижняя линия

Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) допускает содержание бензоата натрия в пищевых продуктах и ​​напитках в концентрации до 0,1% по весу. Если он используется, он должен быть включен в список ингредиентов продаваемого продукта.

В вашем организме не накапливается бензоат натрия.Скорее, вы метаболизируете и выделяете его с мочой в течение 24 часов, что способствует его безопасности.

Тем не менее, некоторые люди могут быть более чувствительны к этой добавке. Обратитесь к врачу для проведения соответствующего тестирования, если вы подозреваете, что у вас аллергия на бензоат натрия.

Цитотоксичность ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта на фибробластах десны человека

Front Dent. 2019 ноябрь-декабрь; 16(6): 450–457.

Масумех Хасани Табатабаи

1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

Farzaneh Sadeghi Mahounak

2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

Нафисе Асгари

3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

Зохре Моради

1. Центр стоматологических исследований, Научно-исследовательский институт стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

1. Стоматологические исследования Центр, Научно-исследовательский институт стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

* Автор, ответственный за переписку: Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран, Email:moc [email protected]

Поступила в редакцию 26 мая 2019 г.; Принято 1 сентября 2019 г.

Авторские права © Центр стоматологических исследований, Тегеранский университет медицинских наук0 Лицензия (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4). Некоммерческое использование работы разрешено при условии правильного цитирования оригинальной работы. Эта статья цитировалась другими статьями в PMC.

Abstract

Цели:

Зубные пасты и жидкости для полоскания рта содержат ингредиенты, которые могут быть токсичными для тканей слизистой оболочки полости рта. Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта.

Материалы и методы:

Это экспериментальное исследование было проведено на 16 зубных пастах и ​​четырех ополаскивателях для полости рта, широко доступных на иранском рынке.Во-первых, была определена концентрация шести основных ингредиентов этих продуктов, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия. Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ) использовали для оценки цитотоксичности этих материалов в отношении фибробластов десны человека (HGF). Анализ МТТ проводили через 1, 15 и 30 минут после воздействия пяти концентраций каждого материала в трех экземплярах (в соответствии с концентрациями, полученными на этапе выделения).Данные анализировали с использованием трехфакторного дисперсионного анализа (ANOVA).

Результаты:

Разница в цитотоксичности материалов была статистически значимой (P<0,001). Цитотоксичность зависела от времени и концентрации; при увеличении концентрации материалов их цитотоксичность со временем увеличивалась. Цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина составляла >90%. Цитотоксичность NaF варьировала от 25% до 70%, а цитотоксичность всех концентраций лактата цинка и бензоата натрия составляла <50% для HGF.

Заключение:

Для снижения цитотоксического действия зубных паст лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин следует заменить более безопасными детергентами, а концентрацию фтора снизить до 400 частей на миллион (ppm). В качестве альтернативы фторид можно заменить другими антибактериальными и кариостатическими агентами.

Ключевые слова: Тесты на цитотоксичность, иммунологические; Фторид натрия; додецилсульфат натрия; кокамидопропилбетаин; цинк; парабены; Бензоат натрия

ВВЕДЕНИЕ

Механическое удаление зубного налета является наиболее часто используемым методом поддержания гигиены полости рта и здоровья десен.Зубные пасты и жидкости для полоскания рта обычно используются в качестве дополнения к механическому удалению зубного налета [1].

Здоровье полости рта существенно влияет на качество жизни. Таким образом, необходимость экономически эффективных, безопасных и эффективных мер гигиены полости рта была особо подчеркнута. Чистка зубов с использованием подходящей зубной пасты является наиболее эффективным методом укрепления здоровья полости рта, устранения биопленок и снижения риска развития гингивита [1].

Зубные пасты обладают антибактериальными свойствами и уменьшают возникновение заболеваний, связанных с зубным налетом.Однако в них имеются добавки с возможным токсическим действием на слизистую оболочку полости рта [2, 3]. Зубные пасты содержат три основных ингредиента: фтор, абразивы и моющие средства [4]. Фтор добавляют в зубные пасты для придания им кариостатических свойств; однако он оказывает токсическое действие на все типы клеток. Эти эффекты различаются для разных типов клеток в зависимости от продолжительности воздействия и концентрации фтора. Сообщалось о некрозе как основном механизме гибели клеток после воздействия относительно высоких концентраций фтора [5].Кроме того, воздействие высоких концентраций фтора [10 частей на миллион (млн) и выше] часто приводит к флюорозу, который характеризуется коричневатым изменением цвета эмали, приводящим к пятнистости эмали [6]. Абразивные вещества, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, также добавляют в зубные пасты для придания свойства удаления зубного налета. Бензоат натрия и парабены используются в качестве консервантов в зубных пастах [4].

Моющие средства, присутствующие в составе зубных паст, включают лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин.Лаурилсульфат натрия показал значительные токсические эффекты in vitro [4]. Он может изменять белки слизистой оболочки полости рта in vitro [7] и увеличивать кровоток в деснах [8]. Лактат цинка является еще одним ингредиентом зубных паст с антимикробными свойствами [9]. В зубные пасты также добавляют десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции, которые могут оказывать токсическое действие [4]. Например, парабен влияет на эндокринную систему и нарушает выработку гормонов.Он также канцерогенен [10]. Бензоат натрия может вызывать анафилактический шок, отек слизистой оболочки носа и одышку [10]. Лактат цинка также используется в составе зубных паст и может негативно влиять на дыхательную систему [10]. Кокамидопропилбетаин используется в составе зубных паст в качестве пенообразователя и может вызывать аллергические реакции [10].

Предыдущие исследования теоретически показали токсичность этих материалов; однако не определена конкретная концентрация в качестве порога цитотоксичности этих агентов.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта, обычно доступных на иранском рынке. Цитотоксичность различных ингредиентов сравнивали, чтобы найти материал с самой высокой цитотоксичностью.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В этом экспериментальном исследовании in vitro использовались шестнадцать зубных паст, а именно Sanino kids (Evyap, Стамбул, Турция), Sehat (Sehat Co., Тегеран, Иран), Oral-B PRO-EXPERT (Procter & Gamble). Co., Цинциннати, Огайо, США), Crest 7 Complete (Procter & Gamble Co., Цинциннати, Огайо, США), Colgate (Colgate Palmolive Co., Пискатауэй, Нью-Джерси, США), Crend 3 (Pakrokh Cosmetic and Hygienic Co., Тегеран, Иран), Pooneh (Паксан, Тегеран, Иран), Parodontax GUM CARE ( GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Close Up (Юнилевер, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Nasim (Паксан, Тегеран, Иран), Sensodyne (GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Bath (Iran Avandfar Co. Ltd. , Альборз, Иран), Signal (Unilever, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Himalaya Complete Care (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия), Himalaya Sparkling White (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия) и 4 средства для полоскания рта, а именно Irsha ( Shafa Cosmetic Laboratories Co., Тегеран, Иран), Oral-B (Grossgerau Co., Гессен, Германия), Vi-One (Rojn Cosmetic Lab. Co., Тебриз, Иран) и Listerine (Pfizer Inc., Моррис-Плейнс, Нью-Джерси, США). обычно доступные на иранском рынке, были оценены для определения концентрации шести основных ингредиентов в их составе, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия.

Концентрацию NaF в составе зубных паст и ополаскивателей определяли методом потенциометрического титрования.

Выделение лаурилсульфата натрия проводили с использованием активного анионного теста, основанного на стехиометрических реакциях между анионным поверхностно-активным веществом и стандартным раствором амина, приводящих к образованию родственного комплекса в органической фазе.

Для измерения концентрации кокамидопропилбетаина использовали двухфазный (кислотно-основной) титрационный тест с лакмусовыми бумажками (индикаторная бумага Whatman, Camlab, Кембридж, Великобритания). Выделение парабенов из зубных паст и жидкостей для полоскания рта проводили с помощью газовой хроматографии (Shimadzu, Markham, Ontario, Canada).Лактат цинка и бензоат натрия выделяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ; серия Agilent Technologies 1200 Infinity, Санта-Клара, Калифорния, США). Помимо верхнего и нижнего пределов извлеченных концентраций шести ингредиентов, для оценки цитотоксичности каждого экспериментального материала использовали медиану, более высокую концентрацию и более низкую концентрацию (для большей точности).

Клетки, использованные для теста на цитотоксичность:

Клеточная линия HuGu фибробластов десны человека (HGF; Cell No.IBRC {«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«text»:»C10459″,»term_id»:»1535530″,»term_text»:»C10459″}}C10459), установленный из биопсии десны 45-летней женщины homo-sapien, были получены из банка клеток Иранского центра биологических ресурсов (IBRC). Культуральная среда состояла из модифицированной Дульбекко среды Игла (DMEM), 2 мМ L-глютамина и 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS). Среда для хранения включала 90 % FBS и 10 % диметилсульфоксида (ДМСО) в концентрации примерно 1×10.

6 клеток/флакон инкубировали при 37°C с 5% диоксидом углерода (CO 2 ).HGF прилипли ко дну культурального планшета. Таким образом, для отсоединения клеток использовали трипсин. В каждой лунке 96-луночного планшета требовалось 10 000 клеток на 100 мкл (около миллиона клеток).

Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ):

Анализ МТТ использовался для оценки цитотоксичности материалов. По сто мкл каждой клеточной суспензии добавляли в 96-луночный планшет и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажность от 12 до 24 часов для обеспечения прикрепления клеток.Затем в каждую лунку через указанный период добавляли чистые материалы (Merck, Rahway, NJ, USA) в соответствующих концентрациях плюс 10 мкл красителя МТТ. Три лунки, содержащие 100 мкл культуральной среды плюс 10 мкл МТТ, считали пустыми. Планшет накрывали алюминиевой фольгой и инкубировали при 37°С с 5% СО.

2 и 100% влажности в течение четырех часов. Наличие пурпурных отложений оценивали под инвертированным микроскопом. Затем из лунок удаляли культуральную среду (содержащую прикрепленные клетки) и в каждую лунку добавляли по 100 мкл ДМСО.Затем планшеты помещали в темноту на два-четыре часа и определяли оптическую плотность (ОП) лунок (как для экспериментальных, так и для пустых лунок) с помощью спектрофотометра (X-Rite, Гранд-Рапидс, Мичиган, США). на длине волны 570 нм. Результаты регистрировали для количественного сравнения пролиферации клеток. Все вышеперечисленные процедуры повторялись трижды. Это было сделано для всех шести ингредиентов в указанных концентрациях через 1, 15 и 30 минут после воздействия. Для этой цели использовали трехлуночные планшеты для трех повторов.Например, для материала с пятью концентрациями было выделено 15 лунок. Когда материал добавляли в лунку, фиксировали время и через минуту добавляли МТТ. Через одну минуту в каждую лунку добавляли 10 мкл МТТ в конечной концентрации 5 мг/мл. Остальные шаги были такими же, как упомянутые ранее. То же самое было сделано для оценок через 15 и 30 минут с той разницей, что МТТ добавляли в лунки через 15 и 30 минут после воздействия.

Статистический анализ:

Трехфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) использовали для оценки влияния времени, концентрации и типа ингредиента на цитотоксичность.Р<0,05 считалось статистически значимым.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Концентрации экстрагированных ингредиентов, полученные с использованием соответствующих методов, были следующими (%: мг/100 мл дистиллированной воды):

    • NAF: 160-1400 PPM

    • Натрий Лаурилсульфат: 0,75-2,75%

    • Cocamidropyl Betaine: 1,5-4%

    • Зинк Лактат: 0,1-0,4%

    • Paraben: 0,01–0,1 %

    • Бензоат натрия: 0.1–0,3 %

    Концентрации, использованные для анализа МТТ, представлены в . Трехсторонний ANOVA показал значительную разницу в цитотоксичности парабена, лактата цинка и бензоата натрия (P<0,001). Кроме того, разница в цитотоксичности каждого материала через 1, 15 и 30 минут после воздействия была статистически значимой (P<0,001). Были отмечены значительные различия в цитотоксичности лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина и NaF во всех концентрациях через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

    Таблица 1:

    Концентрация шести ингредиентов, используемых для оценки цитотоксичности

    9 7
    Материалы Концентрации, используемые для оценки цитотоксичности
    Фторид натрия 1400 PPM 1400 1000 частей на миллион 400 частей на миллион 160 частей на миллион
    Лаурилсульфат натрия (%) 5.5 2 2.75 1.5 0.75 0.37
    Cocamidropopyl Betaine (%) 8 4 2 2 1.5 1
    0.6 0.6 0,2 0.2 0,1 0,05
    0,2 0.2 0,1 0,02 0,01 0.005
    натрия Бензоат (%) 0.6 0,3 0,15 0,1 0,03

    Результаты анализа МТТ для шести ингредиентов были следующими. , парабен и лактат цинка (P<0,001). Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую цитотоксичность, а парабен показал низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

    Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую, а парабен — низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,001). Во всех трех временных точках наибольшую цитотоксичность показал лаурилсульфат натрия, а наименьшую цитотоксичность показал NaF.

    Бензоат натрия, парабен и лактат цинка имели самую низкую цитотоксичность во всех трех временных точках.Цитотоксичность всех трех ингредиентов во всех концентрациях составляла менее 50%. Другими словами, бензоат натрия, парабен и лактат цинка устраняют менее 50% HGF.

    Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин во все моменты времени приводили к элиминации значительного процента клеток и обладали самой высокой цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF.

    Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено в .бетаин во все моменты времени приводил к элиминации значительного процента клеток и обладал наибольшей цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF. Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено на рис.

    Планка погрешности средних значений и 95% доверительный интервал (ДИ) среднего процента жизнеспособности клеток для различных концентраций исследуемых материалов через 1, 15 и 30 минут.

    ОБСУЖДЕНИЕ

    Все химические вещества, применяемые в ротовой полости, должны оцениваться с точки зрения цитотоксичности. Стоматологические материалы проходят различные испытания Американской стоматологической ассоциации (ADA), Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) и Международной организации по стандартизации (ISO). Один из основных тестов включает использование клеточной культуры для определения цитотоксического действия этих материалов. Тест МТТ основан на превращении бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия в кристаллы формазана жизнеспособными клетками.Поскольку в большинстве клеточных популяций общая митохондриальная активность зависит от количества жизнеспособных клеток, этот тест используют для оценки токсического действия лекарственных препаратов на клетки in vitro [2].

    Зубные пасты используются для ежедневного ухода за зубами; однако их влияние на клетки слизистой оболочки полости рта изучено недостаточно. Поскольку эти материалы находятся в непосредственном контакте со слизистой оболочкой, необходимо исследовать все их негативные эффекты [2]. В некоторых предыдущих исследованиях оценивалась цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта, а в некоторых из них сообщалось о токсичности зубных паст для клеток слизистой оболочки полости рта [2,4].

    Зубные пасты состоят из трех основных компонентов, включая (I) детергенты, такие как лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин, (II) нерастворимые абразивы для удаления зубного налета, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, и (III) кариостатические агенты, такие как соединения фтора (NaF и монофторфосфат натрия). Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин относятся к числу наиболее токсичных компонентов в составе зубных паст [2]. Другие вещества, добавляемые в зубные пасты для различных функций, включают десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции; каждый из этих агентов может оказывать токсическое действие [4].В дополнение к зубным пастам лактат цинка, парабен и бензоат натрия также добавляют в качестве антимикробных агентов и пищевых консервантов. В некоторых исследованиях оценивалась канцерогенность этих материалов, особенно парабенов [11,12].

    Поскольку любой из ингредиентов зубной пасты может оказывать токсическое воздействие на клетки слизистой оболочки полости рта, и ни одно из предыдущих исследований не сравнивало цитотоксичность ингредиентов зубной пасты и жидкости для полоскания рта при их стандартных концентрациях, в этом исследовании оценивалась цитотоксичность шести основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта по отношению к HGF, которые являются наиболее устойчивыми клетками к апоптозу и мутации.

    Cvikl et al. [4] оценили влияние ингредиентов зубной пасты на жизнеспособность клеток. Они оценили девять зубных паст с различными моющими средствами, подвергая HGF воздействию 1% концентрации этих зубных паст в течение двух минут. Они показали, что зубные пасты, содержащие лаурилсульфат натрия и фторид амина, сильно снижают жизнеспособность клеток, в то время как зубные пасты, содержащие кокамидопропилбетаин, оказывают меньшее влияние на жизнеспособность клеток [4]. Одним из недостатков цитируемого исследования было отсутствие внимания к времени как влиятельному фактору цитотоксичности, поскольку все тесты проводились через две минуты, и все материалы были признаны цитотоксичными.В нашем исследовании было обнаружено, что время оказывает значительное влияние на цитотоксичность, и цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина оценивали в трех временных точках и пяти концентрациях.

    В нашем исследовании цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина была самой высокой, что сходно с результатами Cvikl et al [4]. Эти два детергента обладают высокой цитотоксичностью вскоре после воздействия и даже при концентрациях намного ниже безопасного порога для использования в зубных пастах.В нашем исследовании цитотоксичность кокамидопропилбетаина была несколько меньше, чем у лаурилсульфата натрия.

    Jeng et al. [13] оценили цитотоксичность NaF в отношении фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. Результаты показали, что NaF в концентрациях 4 ммоль/л (80 частей на миллион) и выше токсичен для фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. NaF в концентрациях 4, 8 и 12 ммоль/л через два часа инкубации ингибировал активность митохондрий на 31, 56 и 57% соответственно [13].

    Их результаты отличались от наших.В настоящем исследовании цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем и увеличивалась со временем. Другими словами, концентрация NaF 1000 частей на миллион в течение одной минуты, 400 частей на миллион в течение 15 минут и 160 частей на миллион в течение 30 минут были нетоксичными, в то время как увеличение времени с одной минуты до 15 минут для концентрации 1000 частей на миллион и от От 15 до 30 минут для концентрации 400 частей на миллион повышали цитотоксичность в отношении HGF. Это может быть связано с разными методологиями.

    Torrado et al. [3] оценили цитотоксичность зубных паст Crest Extra Whitening и NMTD на фибробластах мыши с использованием анализа МТТ.Они сообщили, что ни одна из зубных паст не оказала существенного влияния на жизнеспособность клеток, а при увеличении времени инкубации значительно возрастала цитотоксичность [3].

    Все зубные пасты, включая Crest Extra Whitening, содержат значительное количество детергентов. В текущем исследовании было обнаружено, что даже самая низкая концентрация детергентов, используемых в зубных пастах, является цитотоксичной для HGF. Более того, эта цитотоксичность увеличивалась со временем. Основным недостатком исследования Torrado et al. [3] было то, что они оценивали цитотоксичность зубных паст с использованием мышиных фибробластов, что может быть причиной различий в результатах.

    Camargo et al. [14] сравнили цитотоксичность (анализ МТТ), оценили генетическую токсичность (путем наблюдения за изменениями в ядрах фибробластов хомяков) и оценили изменения шероховатости поверхности эмали, вызванные отбеливающими зубными пастами (Colgate и Oral- Б) и не отбеливающие зубные пасты. Цитотоксичность, генетическая токсичность и шероховатость поверхности, вызванные двумя отбеливающими зубными пастами, были выше, чем у других зубных паст. Также цитотоксичность Colgate Whitening была выше, чем у зубной пасты Oral-B [14].Их выводы относительно более высокой цитотоксичности отбеливающих средств по сравнению с не отбеливающими зубными пастами согласуются с нашими результатами. Отбеливающие зубные пасты содержат большее количество лаурилсульфата натрия, и, согласно нашим результатам, лаурилсульфат натрия обладает самой высокой цитотоксичностью среди шести основных ингредиентов зубных паст и отвечает за более высокую цитотоксичность отбеливающих зубных паст.

    Цай и др. [15] оценили влияние бензоата натрия на личинок одного типа рыб и сообщили, что концентрация бензоата натрия 2000 ppm была высокотоксичной для личинок; 1400-1500 ppm бензоата натрия вызывали гибель более 50% личинок.Они также показали, что бензоат натрия более токсичен для мышечных клеток и нейронов [15].

    Бензоат натрия используется в пищевых продуктах, косметике и средствах гигиены в качестве консерванта. Вышеупомянутое исследование выявило цитотоксичность концентрации бензоата натрия > 1400 ppm для мышечных клеток и нейронов, независимо от его безопасной концентрации для использования в пищевых продуктах, косметике и гигиенических продуктах [15]. Однако наши результаты показали, что бензоат натрия в стандартных концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не был токсичен для HGF.

    Харви и Эверетт [16] оценили роль парабенов в развитии рака молочной железы. Они обнаружили большое количество парабена в резецированных опухолевых тканях и заявили, что парабен может играть роль в увеличении частоты рака молочной железы [16].

    Отрицательное и канцерогенное воздействие консервантов, таких как парабены, в продуктах питания, косметике и средствах гигиены ранее было задокументировано. Эти эффекты в основном обусловлены длительным (в течение многих лет) контактом с веществами, содержащими парабен, и его накопительным действием, что в конечном итоге вызывает рак у человека [16].

    В текущем исследовании парабены в концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не оказывали токсического действия на HGF через 1, 15 и 30 минут. Однако необходимы дальнейшие исследования неблагоприятных системных эффектов и канцерогенеза других концентраций парабенов при более длительном воздействии. Нг и др. [17] оценили цитотоксичность и генетическую токсичность оксида цинка для фибробластов легких человека и плодовой мухи in vitro и in vivo. Они заметили, что оксид цинка вызывает гибель фибробластов легких человека.Более того, окислительный стресс вызвал повреждение ДНК в этих клетках. Оксид цинка значительно увеличивал смертность дрозофил в период их развития от вылупления до половозрелости [17].

    В текущем исследовании цитотоксичность лактата цинка оценивалась вместо оксида цинка из-за важной роли лактата цинка и его антибактериальной активности в зубных пастах. В исследовании Ng et al. [17] не учитывалась концентрация оксида цинка или время воздействия при оценке токсичности.Кроме того, несмотря на очень схожую химическую активность и токсическое действие оксида цинка и лактата цинка, цитотоксические эффекты оксида цинка, о которых сообщалось в цитируемом исследовании, были намного выше, чем у лактата цинка в нашем исследовании, что может быть связано с тем, что они не учитывали концентрация вещества и продолжительность воздействия. Кроме того, в двух исследованиях оценивали различные типы клеток (фибробласты легких человека по сравнению с HGF).

    ЗАКЛЮЧЕНИЕ

    В рамках ограничений данного исследования можно сделать следующие выводы:

    1. Цитотоксичность NaF при концентрации 1400 частей на миллион (максимальная концентрация, используемая в зубных пастах) через одну минуту составила 53%, тогда как его цитотоксичность при концентрации 160 частей на миллион (минимальная концентрация, используемая в зубных пастах и ​​ополаскивателях) составляла 25%.Цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем; через 30 минут цитотоксичность концентрации NaF 160 ppm увеличилась до 50%. Самая высокая цитотоксичность NaF составила 71% (1400 ppm за 30 минут).

    2. Порог концентрации фтора 400 ppm; он не был токсичен для HGF через 1, 15 и 30 минут воздействия.

    3. Лаурилсульфат натрия обладал самой высокой цитотоксичностью во всех временных точках и показал >90% токсичности при всех концентрациях.

    4. Кокамидопропилбетаин обладает цитотоксичностью от 85% до 97%. Обладал самой высокой цитотоксичностью после лаурилсульфата натрия. Его цитотоксичность имела значительную корреляцию со временем и концентрацией; при увеличении концентрации и времени цитотоксичность возрастала.

    5. При увеличении концентрации лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта повышалась.

    6. Бензоат натрия и парабен показали самую низкую цитотоксичность.Кроме того, 0,6% концентрация бензоата натрия через 30 минут (30% цитотоксичность) и 0,2% концентрация парабена через 30 минут (40% цитотоксичность) показали самую высокую цитотоксичность.

    БЛАГОДАРНОСТЬ

    Мы хотели бы выразить нашу огромную признательность доктору Пуяну Аминишакиб, доценту кафедры оральной и челюстно-лицевой патологии Школы стоматологии Тегеранского университета медицинских наук.

    Сноски

    ЗАЯВЛЕНИЕ О КОНФЛИКТЕ ИНТЕРЕСОВ

    Не заявлено

    ССЫЛКИ

    1.Бинни А., Адди М., Ньюкомб Р.Г. Эффекты удаления зубного налета при однократном полоскании и чистке щеткой. J Пародонтол. 1993. Март; 64( 3): 181– 5. [PubMed] [Google Scholar]2. Гапанчи Дж., Камали Ф., Моаттари А., Пуршахиди С., Шахин Э., Резазаде Ф. и др. Сравнение in vitro цитотоксического и антибактериального действия 16 коммерческих зубных паст. J Int Здоровье полости рта. 2015. Март; 7( 3): 39– 43. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Торрадо А., Валиенте М., Чжан В., Ли Ю., Муньос К.А. Цитотоксичность новой зубной пасты на основе смеси ионообменных смол.Эм Джей Дент. 2005. Август; 18( 4): 267– 9. [PubMed] [Google Scholar]4. Цвикл Б., Лусси А., Грубер Р. Влияние экстрактов зубной пасты in vitro на жизнеспособность клеток. Eur J Oral Sci. 2015. Июнь; 123( 3): 179– 85. [PubMed] [Google Scholar]5. Барбье О., Арреола-Мендоса Л., Дель Разо Л.М. Молекулярные механизмы фторидной токсичности. Химическое биологическое взаимодействие. 2010. ноябрь 5; 188( 2): 319– 33. [PubMed] [Google Scholar]6. Риттер А.В., Эйдсон Р.С., Донован Т.Е. Кариес зубов: этиология, клинические характеристики, оценка риска и лечение.В: Хейманн Х.О., Свифт Э.Дж., Риттер А.В. (редакторы). Стердеванта «Искусство и наука оперативной стоматологии». Эльзевир/Мосби, Сент-Луис, Миссури, 2013: 41– 88. [Google Академия]7. Хили К.М., Крачли А.Т., Торнхилл М.Х., Уильямс Д.М. Влияние лаурилсульфата натрия, триклозана и цинка на проницаемость нормальной слизистой оболочки полости рта. Оральный Дис. 2000. Март; 6( 2): 118– 23. [PubMed] [Google Scholar]8. Херлофсон Б.Б., Бродин П., Аарс Х. Увеличение кровотока в деснах человека, вызванное лаурилсульфатом натрия. Дж. Клин Пародонтол.1996. ноябрь; 23( 11): 1004– 7. [PubMed] [Google Scholar]9. Харасти В.И., Замбон Дж.Дж., Шринивасан П.К. Оценка противомикробной активности средств для ухода за зубами на бактериях ротовой полости человека. Джей Клин Дент. 2010 г.; 21( 4): 96– 100. [PubMed] [Google Scholar] 10. Новак К, Ратайчак-Врона В, Гурска М, Яблонска Э. Парабены и их влияние на эндокринную систему. Мол Селл Эндокринол. 2018. Октябрь 15; 474: 238– 251. [PubMed] [Google Scholar] 11. Наир Б. Заключительный отчет по оценке безопасности бензилового спирта, бензойной кислоты и бензоата натрия.Int J Toxicol. 2001 г.; 20 Приложение 3: 23– 50. [PubMed] [Google Scholar] 12. Park YD, Jang JH, Park JE, Kim JH, Kim EC, Song YJ и др. Анализ парабенов в средствах для ухода за зубами и полости рта. Биомед Хроматогр. 2014. Декабрь; 28( 12): 1692– 700. [PubMed] [Google Scholar] 13. Jeng JH, Hsieh CC, Lan WH, Chang MC, Lin SK, Hahn LJ, et al. Цитотоксичность фторида натрия на фибробластах слизистой оболочки полости рта человека и ее механизмы. Клеточный Биол Токсикол. 1998. Декабрь; 14( 6): 383– 9. [PubMed] [Google Scholar] 14.Камарго С.Е., Хояс Р.П., Сантана-Мело Г.Ф., Феррейра Л.Т., Эль Ачкар В.Н., Роде Сде М. Обычные и отбеливающие зубные пасты: цитотоксичность, генотоксичность и влияние на поверхность эмали. Эм Джей Дент. 2014. Декабрь; 27( 6): 307– 11. [PubMed] [Google Scholar] 15. Tsay HJ, Wang YH, Chen WL, Huang MY, Chen YH. Лечение бензоатом натрия приводит к уродству личинок рыбок данио. Нейротоксикол Тератол. 2007. сентябрь-октябрь; 29( 5): 562– 9. [PubMed] [Google Scholar] 16. Харви П.В., Эверетт Д.Дж. Значение обнаружения эфиров п-гидроксибензойной кислоты (парабенов) в опухолях молочной железы человека.J Appl Toxicol. 2004. январь-февраль; 24( 1): 1– 4. [PubMed] [Google Scholar] 17. Ng CT, Yong LQ, Hande MP, Ong CN, Yu LE, Bay BH и соавт. Наночастицы оксида цинка проявляют цитотоксичность и генотоксичность в ответ на окислительный стресс в фибробластах легких человека и Drosophila melanogaster. Int J Наномедицина. 2017. февраль 28; 12: 1621– 1637. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

    Цитотоксичность ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта на фибробластах десны человека

    Front Dent.2019 ноябрь-декабрь; 16(6): 450–457. Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран , Иран

    Фарзане Садеги Махунак

    2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

    Нафисе Асгари

    3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

    Зохре Моради

    1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

    2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

    1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

    2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

    3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

    * Автор, ответственный за переписку : Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран, электронная почта: [email protected]

    Поступила в редакцию 26 мая 2019 г.; Принято 1 сентября 2019 г.

    Авторское право © Стоматологический исследовательский центр Тегеранского университета медицинских наук. Эта работа опубликована в виде статьи с открытым доступом, распространяемой на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4). Некоммерческое использование работы разрешено при условии правильного цитирования оригинальной работы. Эта статья цитировалась другими статьями в PMC.

    Abstract

    Цели:

    Зубные пасты и жидкости для полоскания рта содержат ингредиенты, которые могут быть токсичными для тканей слизистой оболочки полости рта.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта.

    Материалы и методы:

    Это экспериментальное исследование было проведено на 16 зубных пастах и ​​четырех ополаскивателях для полости рта, широко доступных на иранском рынке. Во-первых, была определена концентрация шести основных ингредиентов этих продуктов, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия. Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ) использовали для оценки цитотоксичности этих материалов в отношении фибробластов десны человека (HGF).Анализ МТТ проводили через 1, 15 и 30 минут после воздействия пяти концентраций каждого материала в трех экземплярах (в соответствии с концентрациями, полученными на этапе выделения). Данные анализировали с использованием трехфакторного дисперсионного анализа (ANOVA).

    Результаты:

    Разница в цитотоксичности материалов была статистически значимой (P<0,001). Цитотоксичность зависела от времени и концентрации; при увеличении концентрации материалов их цитотоксичность со временем увеличивалась.Цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина составляла >90%. Цитотоксичность NaF варьировала от 25% до 70%, а цитотоксичность всех концентраций лактата цинка и бензоата натрия составляла <50% для HGF.

    Заключение:

    Для снижения цитотоксического действия зубных паст лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин следует заменить более безопасными детергентами, а концентрацию фтора снизить до 400 частей на миллион (ppm). В качестве альтернативы фторид можно заменить другими антибактериальными и кариостатическими агентами.

    Ключевые слова: Тесты на цитотоксичность, иммунологические; Фторид натрия; додецилсульфат натрия; кокамидопропилбетаин; цинк; парабены; Бензоат натрия

    ВВЕДЕНИЕ

    Механическое удаление зубного налета является наиболее часто используемым методом поддержания гигиены полости рта и здоровья десен. Зубные пасты и жидкости для полоскания рта обычно используются в качестве дополнения к механическому удалению зубного налета [1].

    Здоровье полости рта существенно влияет на качество жизни. Таким образом, необходимость экономически эффективных, безопасных и эффективных мер гигиены полости рта была особо подчеркнута.Чистка зубов с использованием подходящей зубной пасты является наиболее эффективным методом укрепления здоровья полости рта, устранения биопленок и снижения риска развития гингивита [1].

    Зубные пасты обладают антибактериальными свойствами и уменьшают возникновение заболеваний, связанных с зубным налетом. Однако в них имеются добавки с возможным токсическим действием на слизистую оболочку полости рта [2, 3]. Зубные пасты содержат три основных ингредиента: фтор, абразивы и моющие средства [4]. Фтор добавляют в зубные пасты для придания им кариостатических свойств; однако он оказывает токсическое действие на все типы клеток.Эти эффекты различаются для разных типов клеток в зависимости от продолжительности воздействия и концентрации фтора. Сообщалось о некрозе как основном механизме гибели клеток после воздействия относительно высоких концентраций фтора [5]. Кроме того, воздействие высоких концентраций фтора [10 частей на миллион (млн) и выше] часто приводит к флюорозу, который характеризуется коричневатым изменением цвета эмали, приводящим к пятнистости эмали [6]. Абразивные вещества, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, также добавляют в зубные пасты для придания свойства удаления зубного налета.Бензоат натрия и парабены используются в качестве консервантов в зубных пастах [4].

    Моющие средства, присутствующие в составе зубных паст, включают лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин. Лаурилсульфат натрия показал значительные токсические эффекты in vitro [4]. Он может изменять белки слизистой оболочки полости рта in vitro [7] и увеличивать кровоток в деснах [8]. Лактат цинка является еще одним ингредиентом зубных паст с антимикробными свойствами [9]. В зубные пасты также добавляют десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции, которые могут оказывать токсическое действие [4].Например, парабен влияет на эндокринную систему и нарушает выработку гормонов. Он также канцерогенен [10]. Бензоат натрия может вызывать анафилактический шок, отек слизистой оболочки носа и одышку [10]. Лактат цинка также используется в составе зубных паст и может негативно влиять на дыхательную систему [10]. Кокамидопропилбетаин используется в составе зубных паст в качестве пенообразователя и может вызывать аллергические реакции [10].

    Предыдущие исследования теоретически показали токсичность этих материалов; однако не определена конкретная концентрация в качестве порога цитотоксичности этих агентов.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта, обычно доступных на иранском рынке. Цитотоксичность различных ингредиентов сравнивали, чтобы найти материал с самой высокой цитотоксичностью.

    МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

    В этом экспериментальном исследовании in vitro использовались шестнадцать зубных паст, а именно Sanino kids (Evyap, Стамбул, Турция), Sehat (Sehat Co., Тегеран, Иран), Oral-B PRO-EXPERT (Procter & Gamble). Co., Цинциннати, Огайо, США), Crest 7 Complete (Procter & Gamble Co., Цинциннати, Огайо, США), Colgate (Colgate Palmolive Co., Пискатауэй, Нью-Джерси, США), Crend 3 (Pakrokh Cosmetic and Hygienic Co., Тегеран, Иран), Pooneh (Паксан, Тегеран, Иран), Parodontax GUM CARE ( GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Close Up (Юнилевер, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Nasim (Паксан, Тегеран, Иран), Sensodyne (GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Bath (Iran Avandfar Co. Ltd. , Альборз, Иран), Signal (Unilever, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Himalaya Complete Care (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия), Himalaya Sparkling White (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия) и 4 средства для полоскания рта, а именно Irsha ( Shafa Cosmetic Laboratories Co., Тегеран, Иран), Oral-B (Grossgerau Co., Гессен, Германия), Vi-One (Rojn Cosmetic Lab. Co., Тебриз, Иран) и Listerine (Pfizer Inc., Моррис-Плейнс, Нью-Джерси, США). обычно доступные на иранском рынке, были оценены для определения концентрации шести основных ингредиентов в их составе, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия.

    Концентрацию NaF в составе зубных паст и ополаскивателей определяли методом потенциометрического титрования.

    Выделение лаурилсульфата натрия проводили с использованием активного анионного теста, основанного на стехиометрических реакциях между анионным поверхностно-активным веществом и стандартным раствором амина, приводящих к образованию родственного комплекса в органической фазе.

    Для измерения концентрации кокамидопропилбетаина использовали двухфазный (кислотно-основной) титрационный тест с лакмусовыми бумажками (индикаторная бумага Whatman, Camlab, Кембридж, Великобритания). Выделение парабенов из зубных паст и жидкостей для полоскания рта проводили с помощью газовой хроматографии (Shimadzu, Markham, Ontario, Canada).Лактат цинка и бензоат натрия выделяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ; серия Agilent Technologies 1200 Infinity, Санта-Клара, Калифорния, США). Помимо верхнего и нижнего пределов извлеченных концентраций шести ингредиентов, для оценки цитотоксичности каждого экспериментального материала использовали медиану, более высокую концентрацию и более низкую концентрацию (для большей точности).

    Клетки, использованные для теста на цитотоксичность:

    Клеточная линия HuGu фибробластов десны человека (HGF; Cell No.IBRC {«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«text»:»C10459″,»term_id»:»1535530″,»term_text»:»C10459″}}C10459), установленный из биопсии десны 45-летней женщины homo-sapien, были получены из банка клеток Иранского центра биологических ресурсов (IBRC). Культуральная среда состояла из модифицированной Дульбекко среды Игла (DMEM), 2 мМ L-глютамина и 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS). Среда для хранения включала 90 % FBS и 10 % диметилсульфоксида (ДМСО) в концентрации примерно 1×10. 6 клеток/флакон инкубировали при 37°C с 5% диоксидом углерода (CO 2 ).HGF прилипли ко дну культурального планшета. Таким образом, для отсоединения клеток использовали трипсин. В каждой лунке 96-луночного планшета требовалось 10 000 клеток на 100 мкл (около миллиона клеток).

    Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ):

    Анализ МТТ использовался для оценки цитотоксичности материалов. По сто мкл каждой клеточной суспензии добавляли в 96-луночный планшет и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажность от 12 до 24 часов для обеспечения прикрепления клеток.Затем в каждую лунку через указанный период добавляли чистые материалы (Merck, Rahway, NJ, USA) в соответствующих концентрациях плюс 10 мкл красителя МТТ. Три лунки, содержащие 100 мкл культуральной среды плюс 10 мкл МТТ, считали пустыми. Планшет накрывали алюминиевой фольгой и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажности в течение четырех часов. Наличие пурпурных отложений оценивали под инвертированным микроскопом. Затем из лунок удаляли культуральную среду (содержащую прикрепленные клетки) и в каждую лунку добавляли по 100 мкл ДМСО.Затем планшеты помещали в темноту на два-четыре часа и определяли оптическую плотность (ОП) лунок (как для экспериментальных, так и для пустых лунок) с помощью спектрофотометра (X-Rite, Гранд-Рапидс, Мичиган, США). на длине волны 570 нм. Результаты регистрировали для количественного сравнения пролиферации клеток. Все вышеперечисленные процедуры повторялись трижды. Это было сделано для всех шести ингредиентов в указанных концентрациях через 1, 15 и 30 минут после воздействия. Для этой цели использовали трехлуночные планшеты для трех повторов.Например, для материала с пятью концентрациями было выделено 15 лунок. Когда материал добавляли в лунку, фиксировали время и через минуту добавляли МТТ. Через одну минуту в каждую лунку добавляли 10 мкл МТТ в конечной концентрации 5 мг/мл. Остальные шаги были такими же, как упомянутые ранее. То же самое было сделано для оценок через 15 и 30 минут с той разницей, что МТТ добавляли в лунки через 15 и 30 минут после воздействия.

    Статистический анализ:

    Трехфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) использовали для оценки влияния времени, концентрации и типа ингредиента на цитотоксичность.Р<0,05 считалось статистически значимым.

    РЕЗУЛЬТАТЫ

    Концентрации экстрагированных ингредиентов, полученные с использованием соответствующих методов, были следующими (%: мг/100 мл дистиллированной воды):

      • NAF: 160-1400 PPM

      • Натрий Лаурилсульфат: 0,75-2,75%

      • Cocamidropyl Betaine: 1,5-4%

      • Зинк Лактат: 0,1-0,4%

      • Paraben: 0,01–0,1 %

      • Бензоат натрия: 0.1–0,3 %

      Концентрации, использованные для анализа МТТ, представлены в . Трехсторонний ANOVA показал значительную разницу в цитотоксичности парабена, лактата цинка и бензоата натрия (P<0,001). Кроме того, разница в цитотоксичности каждого материала через 1, 15 и 30 минут после воздействия была статистически значимой (P<0,001). Были отмечены значительные различия в цитотоксичности лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина и NaF во всех концентрациях через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

      Таблица 1:

      Концентрация шести ингредиентов, используемых для оценки цитотоксичности

      9 7
      Материалы Концентрации, используемые для оценки цитотоксичности
      Фторид натрия 1400 PPM 1400 1000 частей на миллион 400 частей на миллион 160 частей на миллион
      Лаурилсульфат натрия (%) 5.5 2 2.75 1.5 0.75 0.37
      Cocamidropopyl Betaine (%) 8 4 2 2 1.5 1
      0.6 0.6 0,2 0.2 0,1 0,05
      0,2 0.2 0,1 0,02 0,01 0.005
      натрия Бензоат (%) 0.6 0,3 0,15 0,1 0,03

      Результаты анализа МТТ для шести ингредиентов были следующими. , парабен и лактат цинка (P<0,001). Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую цитотоксичность, а парабен показал низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

      Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую, а парабен — низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,001). Во всех трех временных точках наибольшую цитотоксичность показал лаурилсульфат натрия, а наименьшую цитотоксичность показал NaF.

      Бензоат натрия, парабен и лактат цинка имели самую низкую цитотоксичность во всех трех временных точках.Цитотоксичность всех трех ингредиентов во всех концентрациях составляла менее 50%. Другими словами, бензоат натрия, парабен и лактат цинка устраняют менее 50% HGF.

      Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин во все моменты времени приводили к элиминации значительного процента клеток и обладали самой высокой цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF.

      Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено в .бетаин во все моменты времени приводил к элиминации значительного процента клеток и обладал наибольшей цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF. Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено на рис.

      Планка погрешности средних значений и 95% доверительный интервал (ДИ) среднего процента жизнеспособности клеток для различных концентраций исследуемых материалов через 1, 15 и 30 минут.

      ОБСУЖДЕНИЕ

      Все химические вещества, применяемые в ротовой полости, должны оцениваться с точки зрения цитотоксичности. Стоматологические материалы проходят различные испытания Американской стоматологической ассоциации (ADA), Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) и Международной организации по стандартизации (ISO). Один из основных тестов включает использование клеточной культуры для определения цитотоксического действия этих материалов. Тест МТТ основан на превращении бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия в кристаллы формазана жизнеспособными клетками.Поскольку в большинстве клеточных популяций общая митохондриальная активность зависит от количества жизнеспособных клеток, этот тест используют для оценки токсического действия лекарственных препаратов на клетки in vitro [2].

      Зубные пасты используются для ежедневного ухода за зубами; однако их влияние на клетки слизистой оболочки полости рта изучено недостаточно. Поскольку эти материалы находятся в непосредственном контакте со слизистой оболочкой, необходимо исследовать все их негативные эффекты [2]. В некоторых предыдущих исследованиях оценивалась цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта, а в некоторых из них сообщалось о токсичности зубных паст для клеток слизистой оболочки полости рта [2,4].

      Зубные пасты состоят из трех основных компонентов, включая (I) детергенты, такие как лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин, (II) нерастворимые абразивы для удаления зубного налета, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, и (III) кариостатические агенты, такие как соединения фтора (NaF и монофторфосфат натрия). Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин относятся к числу наиболее токсичных компонентов в составе зубных паст [2]. Другие вещества, добавляемые в зубные пасты для различных функций, включают десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции; каждый из этих агентов может оказывать токсическое действие [4].В дополнение к зубным пастам лактат цинка, парабен и бензоат натрия также добавляют в качестве антимикробных агентов и пищевых консервантов. В некоторых исследованиях оценивалась канцерогенность этих материалов, особенно парабенов [11,12].

      Поскольку любой из ингредиентов зубной пасты может оказывать токсическое воздействие на клетки слизистой оболочки полости рта, и ни одно из предыдущих исследований не сравнивало цитотоксичность ингредиентов зубной пасты и жидкости для полоскания рта при их стандартных концентрациях, в этом исследовании оценивалась цитотоксичность шести основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта по отношению к HGF, которые являются наиболее устойчивыми клетками к апоптозу и мутации.

      Cvikl et al. [4] оценили влияние ингредиентов зубной пасты на жизнеспособность клеток. Они оценили девять зубных паст с различными моющими средствами, подвергая HGF воздействию 1% концентрации этих зубных паст в течение двух минут. Они показали, что зубные пасты, содержащие лаурилсульфат натрия и фторид амина, сильно снижают жизнеспособность клеток, в то время как зубные пасты, содержащие кокамидопропилбетаин, оказывают меньшее влияние на жизнеспособность клеток [4]. Одним из недостатков цитируемого исследования было отсутствие внимания к времени как влиятельному фактору цитотоксичности, поскольку все тесты проводились через две минуты, и все материалы были признаны цитотоксичными.В нашем исследовании было обнаружено, что время оказывает значительное влияние на цитотоксичность, и цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина оценивали в трех временных точках и пяти концентрациях.

      В нашем исследовании цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина была самой высокой, что сходно с результатами Cvikl et al [4]. Эти два детергента обладают высокой цитотоксичностью вскоре после воздействия и даже при концентрациях намного ниже безопасного порога для использования в зубных пастах.В нашем исследовании цитотоксичность кокамидопропилбетаина была несколько меньше, чем у лаурилсульфата натрия.

      Jeng et al. [13] оценили цитотоксичность NaF в отношении фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. Результаты показали, что NaF в концентрациях 4 ммоль/л (80 частей на миллион) и выше токсичен для фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. NaF в концентрациях 4, 8 и 12 ммоль/л через два часа инкубации ингибировал активность митохондрий на 31, 56 и 57% соответственно [13].

      Их результаты отличались от наших.В настоящем исследовании цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем и увеличивалась со временем. Другими словами, концентрация NaF 1000 частей на миллион в течение одной минуты, 400 частей на миллион в течение 15 минут и 160 частей на миллион в течение 30 минут были нетоксичными, в то время как увеличение времени с одной минуты до 15 минут для концентрации 1000 частей на миллион и от От 15 до 30 минут для концентрации 400 частей на миллион повышали цитотоксичность в отношении HGF. Это может быть связано с разными методологиями.

      Torrado et al. [3] оценили цитотоксичность зубных паст Crest Extra Whitening и NMTD на фибробластах мыши с использованием анализа МТТ.Они сообщили, что ни одна из зубных паст не оказала существенного влияния на жизнеспособность клеток, а при увеличении времени инкубации значительно возрастала цитотоксичность [3].

      Все зубные пасты, включая Crest Extra Whitening, содержат значительное количество детергентов. В текущем исследовании было обнаружено, что даже самая низкая концентрация детергентов, используемых в зубных пастах, является цитотоксичной для HGF. Более того, эта цитотоксичность увеличивалась со временем. Основным недостатком исследования Torrado et al. [3] было то, что они оценивали цитотоксичность зубных паст с использованием мышиных фибробластов, что может быть причиной различий в результатах.

      Camargo et al. [14] сравнили цитотоксичность (анализ МТТ), оценили генетическую токсичность (путем наблюдения за изменениями в ядрах фибробластов хомяков) и оценили изменения шероховатости поверхности эмали, вызванные отбеливающими зубными пастами (Colgate и Oral- Б) и не отбеливающие зубные пасты. Цитотоксичность, генетическая токсичность и шероховатость поверхности, вызванные двумя отбеливающими зубными пастами, были выше, чем у других зубных паст. Также цитотоксичность Colgate Whitening была выше, чем у зубной пасты Oral-B [14].Их выводы относительно более высокой цитотоксичности отбеливающих средств по сравнению с не отбеливающими зубными пастами согласуются с нашими результатами. Отбеливающие зубные пасты содержат большее количество лаурилсульфата натрия, и, согласно нашим результатам, лаурилсульфат натрия обладает самой высокой цитотоксичностью среди шести основных ингредиентов зубных паст и отвечает за более высокую цитотоксичность отбеливающих зубных паст.

      Цай и др. [15] оценили влияние бензоата натрия на личинок одного типа рыб и сообщили, что концентрация бензоата натрия 2000 ppm была высокотоксичной для личинок; 1400-1500 ppm бензоата натрия вызывали гибель более 50% личинок.Они также показали, что бензоат натрия более токсичен для мышечных клеток и нейронов [15].

      Бензоат натрия используется в пищевых продуктах, косметике и средствах гигиены в качестве консерванта. Вышеупомянутое исследование выявило цитотоксичность концентрации бензоата натрия > 1400 ppm для мышечных клеток и нейронов, независимо от его безопасной концентрации для использования в пищевых продуктах, косметике и гигиенических продуктах [15]. Однако наши результаты показали, что бензоат натрия в стандартных концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не был токсичен для HGF.

      Харви и Эверетт [16] оценили роль парабенов в развитии рака молочной железы. Они обнаружили большое количество парабена в резецированных опухолевых тканях и заявили, что парабен может играть роль в увеличении частоты рака молочной железы [16].

      Отрицательное и канцерогенное воздействие консервантов, таких как парабены, в продуктах питания, косметике и средствах гигиены ранее было задокументировано. Эти эффекты в основном обусловлены длительным (в течение многих лет) контактом с веществами, содержащими парабен, и его накопительным действием, что в конечном итоге вызывает рак у человека [16].

      В текущем исследовании парабены в концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не оказывали токсического действия на HGF через 1, 15 и 30 минут. Однако необходимы дальнейшие исследования неблагоприятных системных эффектов и канцерогенеза других концентраций парабенов при более длительном воздействии. Нг и др. [17] оценили цитотоксичность и генетическую токсичность оксида цинка для фибробластов легких человека и плодовой мухи in vitro и in vivo. Они заметили, что оксид цинка вызывает гибель фибробластов легких человека.Более того, окислительный стресс вызвал повреждение ДНК в этих клетках. Оксид цинка значительно увеличивал смертность дрозофил в период их развития от вылупления до половозрелости [17].

      В текущем исследовании цитотоксичность лактата цинка оценивалась вместо оксида цинка из-за важной роли лактата цинка и его антибактериальной активности в зубных пастах. В исследовании Ng et al. [17] не учитывалась концентрация оксида цинка или время воздействия при оценке токсичности.Кроме того, несмотря на очень схожую химическую активность и токсическое действие оксида цинка и лактата цинка, цитотоксические эффекты оксида цинка, о которых сообщалось в цитируемом исследовании, были намного выше, чем у лактата цинка в нашем исследовании, что может быть связано с тем, что они не учитывали концентрация вещества и продолжительность воздействия. Кроме того, в двух исследованиях оценивали различные типы клеток (фибробласты легких человека по сравнению с HGF).

      ЗАКЛЮЧЕНИЕ

      В рамках ограничений данного исследования можно сделать следующие выводы:

      1. Цитотоксичность NaF при концентрации 1400 частей на миллион (максимальная концентрация, используемая в зубных пастах) через одну минуту составила 53%, тогда как его цитотоксичность при концентрации 160 частей на миллион (минимальная концентрация, используемая в зубных пастах и ​​ополаскивателях) составляла 25%.Цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем; через 30 минут цитотоксичность концентрации NaF 160 ppm увеличилась до 50%. Самая высокая цитотоксичность NaF составила 71% (1400 ppm за 30 минут).

      2. Порог концентрации фтора 400 ppm; он не был токсичен для HGF через 1, 15 и 30 минут воздействия.

      3. Лаурилсульфат натрия обладал самой высокой цитотоксичностью во всех временных точках и показал >90% токсичности при всех концентрациях.

      4. Кокамидопропилбетаин обладает цитотоксичностью от 85% до 97%. Обладал самой высокой цитотоксичностью после лаурилсульфата натрия. Его цитотоксичность имела значительную корреляцию со временем и концентрацией; при увеличении концентрации и времени цитотоксичность возрастала.

      5. При увеличении концентрации лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта повышалась.

      6. Бензоат натрия и парабен показали самую низкую цитотоксичность.Кроме того, 0,6% концентрация бензоата натрия через 30 минут (30% цитотоксичность) и 0,2% концентрация парабена через 30 минут (40% цитотоксичность) показали самую высокую цитотоксичность.

      БЛАГОДАРНОСТЬ

      Мы хотели бы выразить нашу огромную признательность доктору Пуяну Аминишакиб, доценту кафедры оральной и челюстно-лицевой патологии Школы стоматологии Тегеранского университета медицинских наук.

      Сноски

      ЗАЯВЛЕНИЕ О КОНФЛИКТЕ ИНТЕРЕСОВ

      Не заявлено

      ССЫЛКИ

      1.Бинни А., Адди М., Ньюкомб Р.Г. Эффекты удаления зубного налета при однократном полоскании и чистке щеткой. J Пародонтол. 1993. Март; 64( 3): 181– 5. [PubMed] [Google Scholar]2. Гапанчи Дж., Камали Ф., Моаттари А., Пуршахиди С., Шахин Э., Резазаде Ф. и др. Сравнение in vitro цитотоксического и антибактериального действия 16 коммерческих зубных паст. J Int Здоровье полости рта. 2015. Март; 7( 3): 39– 43. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Торрадо А., Валиенте М., Чжан В., Ли Ю., Муньос К.А. Цитотоксичность новой зубной пасты на основе смеси ионообменных смол.Эм Джей Дент. 2005. Август; 18( 4): 267– 9. [PubMed] [Google Scholar]4. Цвикл Б., Лусси А., Грубер Р. Влияние экстрактов зубной пасты in vitro на жизнеспособность клеток. Eur J Oral Sci. 2015. Июнь; 123( 3): 179– 85. [PubMed] [Google Scholar]5. Барбье О., Арреола-Мендоса Л., Дель Разо Л.М. Молекулярные механизмы фторидной токсичности. Химическое биологическое взаимодействие. 2010. ноябрь 5; 188( 2): 319– 33. [PubMed] [Google Scholar]6. Риттер А.В., Эйдсон Р.С., Донован Т.Е. Кариес зубов: этиология, клинические характеристики, оценка риска и лечение.В: Хейманн Х.О., Свифт Э.Дж., Риттер А.В. (редакторы). Стердеванта «Искусство и наука оперативной стоматологии». Эльзевир/Мосби, Сент-Луис, Миссури, 2013: 41– 88. [Google Академия]7. Хили К.М., Крачли А.Т., Торнхилл М.Х., Уильямс Д.М. Влияние лаурилсульфата натрия, триклозана и цинка на проницаемость нормальной слизистой оболочки полости рта. Оральный Дис. 2000. Март; 6( 2): 118– 23. [PubMed] [Google Scholar]8. Херлофсон Б.Б., Бродин П., Аарс Х. Увеличение кровотока в деснах человека, вызванное лаурилсульфатом натрия. Дж. Клин Пародонтол.1996. ноябрь; 23( 11): 1004– 7. [PubMed] [Google Scholar]9. Харасти В.И., Замбон Дж.Дж., Шринивасан П.К. Оценка противомикробной активности средств для ухода за зубами на бактериях ротовой полости человека. Джей Клин Дент. 2010 г.; 21( 4): 96– 100. [PubMed] [Google Scholar] 10. Новак К, Ратайчак-Врона В, Гурска М, Яблонска Э. Парабены и их влияние на эндокринную систему. Мол Селл Эндокринол. 2018. Октябрь 15; 474: 238– 251. [PubMed] [Google Scholar] 11. Наир Б. Заключительный отчет по оценке безопасности бензилового спирта, бензойной кислоты и бензоата натрия.Int J Toxicol. 2001 г.; 20 Приложение 3: 23– 50. [PubMed] [Google Scholar] 12. Park YD, Jang JH, Park JE, Kim JH, Kim EC, Song YJ и др. Анализ парабенов в средствах для ухода за зубами и полости рта. Биомед Хроматогр. 2014. Декабрь; 28( 12): 1692– 700. [PubMed] [Google Scholar] 13. Jeng JH, Hsieh CC, Lan WH, Chang MC, Lin SK, Hahn LJ, et al. Цитотоксичность фторида натрия на фибробластах слизистой оболочки полости рта человека и ее механизмы. Клеточный Биол Токсикол. 1998. Декабрь; 14( 6): 383– 9. [PubMed] [Google Scholar] 14.Камарго С.Е., Хояс Р.П., Сантана-Мело Г.Ф., Феррейра Л.Т., Эль Ачкар В.Н., Роде Сде М. Обычные и отбеливающие зубные пасты: цитотоксичность, генотоксичность и влияние на поверхность эмали. Эм Джей Дент. 2014. Декабрь; 27( 6): 307– 11. [PubMed] [Google Scholar] 15. Tsay HJ, Wang YH, Chen WL, Huang MY, Chen YH. Лечение бензоатом натрия приводит к уродству личинок рыбок данио. Нейротоксикол Тератол. 2007. сентябрь-октябрь; 29( 5): 562– 9. [PubMed] [Google Scholar] 16. Харви П.В., Эверетт Д.Дж. Значение обнаружения эфиров п-гидроксибензойной кислоты (парабенов) в опухолях молочной железы человека.J Appl Toxicol. 2004. январь-февраль; 24( 1): 1– 4. [PubMed] [Google Scholar] 17. Ng CT, Yong LQ, Hande MP, Ong CN, Yu LE, Bay BH и соавт. Наночастицы оксида цинка проявляют цитотоксичность и генотоксичность в ответ на окислительный стресс в фибробластах легких человека и Drosophila melanogaster. Int J Наномедицина. 2017. февраль 28; 12: 1621– 1637. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

      Цитотоксичность ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта на фибробластах десны человека

      Front Dent.2019 ноябрь-декабрь; 16(6): 450–457. Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран , Иран

      Фарзане Садеги Махунак

      2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

      Нафисе Асгари

      3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

      Зохре Моради

      1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

      2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

      1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

      2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

      3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

      * Автор, ответственный за переписку : Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран, электронная почта: [email protected]

      Поступила в редакцию 26 мая 2019 г.; Принято 1 сентября 2019 г.

      Авторское право © Стоматологический исследовательский центр Тегеранского университета медицинских наук. Эта работа опубликована в виде статьи с открытым доступом, распространяемой на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4). Некоммерческое использование работы разрешено при условии правильного цитирования оригинальной работы. Эта статья цитировалась другими статьями в PMC.

      Abstract

      Цели:

      Зубные пасты и жидкости для полоскания рта содержат ингредиенты, которые могут быть токсичными для тканей слизистой оболочки полости рта.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта.

      Материалы и методы:

      Это экспериментальное исследование было проведено на 16 зубных пастах и ​​четырех ополаскивателях для полости рта, широко доступных на иранском рынке. Во-первых, была определена концентрация шести основных ингредиентов этих продуктов, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия. Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ) использовали для оценки цитотоксичности этих материалов в отношении фибробластов десны человека (HGF).Анализ МТТ проводили через 1, 15 и 30 минут после воздействия пяти концентраций каждого материала в трех экземплярах (в соответствии с концентрациями, полученными на этапе выделения). Данные анализировали с использованием трехфакторного дисперсионного анализа (ANOVA).

      Результаты:

      Разница в цитотоксичности материалов была статистически значимой (P<0,001). Цитотоксичность зависела от времени и концентрации; при увеличении концентрации материалов их цитотоксичность со временем увеличивалась.Цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина составляла >90%. Цитотоксичность NaF варьировала от 25% до 70%, а цитотоксичность всех концентраций лактата цинка и бензоата натрия составляла <50% для HGF.

      Заключение:

      Для снижения цитотоксического действия зубных паст лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин следует заменить более безопасными детергентами, а концентрацию фтора снизить до 400 частей на миллион (ppm). В качестве альтернативы фторид можно заменить другими антибактериальными и кариостатическими агентами.

      Ключевые слова: Тесты на цитотоксичность, иммунологические; Фторид натрия; додецилсульфат натрия; кокамидопропилбетаин; цинк; парабены; Бензоат натрия

      ВВЕДЕНИЕ

      Механическое удаление зубного налета является наиболее часто используемым методом поддержания гигиены полости рта и здоровья десен. Зубные пасты и жидкости для полоскания рта обычно используются в качестве дополнения к механическому удалению зубного налета [1].

      Здоровье полости рта существенно влияет на качество жизни. Таким образом, необходимость экономически эффективных, безопасных и эффективных мер гигиены полости рта была особо подчеркнута.Чистка зубов с использованием подходящей зубной пасты является наиболее эффективным методом укрепления здоровья полости рта, устранения биопленок и снижения риска развития гингивита [1].

      Зубные пасты обладают антибактериальными свойствами и уменьшают возникновение заболеваний, связанных с зубным налетом. Однако в них имеются добавки с возможным токсическим действием на слизистую оболочку полости рта [2, 3]. Зубные пасты содержат три основных ингредиента: фтор, абразивы и моющие средства [4]. Фтор добавляют в зубные пасты для придания им кариостатических свойств; однако он оказывает токсическое действие на все типы клеток.Эти эффекты различаются для разных типов клеток в зависимости от продолжительности воздействия и концентрации фтора. Сообщалось о некрозе как основном механизме гибели клеток после воздействия относительно высоких концентраций фтора [5]. Кроме того, воздействие высоких концентраций фтора [10 частей на миллион (млн) и выше] часто приводит к флюорозу, который характеризуется коричневатым изменением цвета эмали, приводящим к пятнистости эмали [6]. Абразивные вещества, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, также добавляют в зубные пасты для придания свойства удаления зубного налета.Бензоат натрия и парабены используются в качестве консервантов в зубных пастах [4].

      Моющие средства, присутствующие в составе зубных паст, включают лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин. Лаурилсульфат натрия показал значительные токсические эффекты in vitro [4]. Он может изменять белки слизистой оболочки полости рта in vitro [7] и увеличивать кровоток в деснах [8]. Лактат цинка является еще одним ингредиентом зубных паст с антимикробными свойствами [9]. В зубные пасты также добавляют десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции, которые могут оказывать токсическое действие [4].Например, парабен влияет на эндокринную систему и нарушает выработку гормонов. Он также канцерогенен [10]. Бензоат натрия может вызывать анафилактический шок, отек слизистой оболочки носа и одышку [10]. Лактат цинка также используется в составе зубных паст и может негативно влиять на дыхательную систему [10]. Кокамидопропилбетаин используется в составе зубных паст в качестве пенообразователя и может вызывать аллергические реакции [10].

      Предыдущие исследования теоретически показали токсичность этих материалов; однако не определена конкретная концентрация в качестве порога цитотоксичности этих агентов.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта, обычно доступных на иранском рынке. Цитотоксичность различных ингредиентов сравнивали, чтобы найти материал с самой высокой цитотоксичностью.

      МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

      В этом экспериментальном исследовании in vitro использовались шестнадцать зубных паст, а именно Sanino kids (Evyap, Стамбул, Турция), Sehat (Sehat Co., Тегеран, Иран), Oral-B PRO-EXPERT (Procter & Gamble). Co., Цинциннати, Огайо, США), Crest 7 Complete (Procter & Gamble Co., Цинциннати, Огайо, США), Colgate (Colgate Palmolive Co., Пискатауэй, Нью-Джерси, США), Crend 3 (Pakrokh Cosmetic and Hygienic Co., Тегеран, Иран), Pooneh (Паксан, Тегеран, Иран), Parodontax GUM CARE ( GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Close Up (Юнилевер, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Nasim (Паксан, Тегеран, Иран), Sensodyne (GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Bath (Iran Avandfar Co. Ltd. , Альборз, Иран), Signal (Unilever, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Himalaya Complete Care (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия), Himalaya Sparkling White (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия) и 4 средства для полоскания рта, а именно Irsha ( Shafa Cosmetic Laboratories Co., Тегеран, Иран), Oral-B (Grossgerau Co., Гессен, Германия), Vi-One (Rojn Cosmetic Lab. Co., Тебриз, Иран) и Listerine (Pfizer Inc., Моррис-Плейнс, Нью-Джерси, США). обычно доступные на иранском рынке, были оценены для определения концентрации шести основных ингредиентов в их составе, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия.

      Концентрацию NaF в составе зубных паст и ополаскивателей определяли методом потенциометрического титрования.

      Выделение лаурилсульфата натрия проводили с использованием активного анионного теста, основанного на стехиометрических реакциях между анионным поверхностно-активным веществом и стандартным раствором амина, приводящих к образованию родственного комплекса в органической фазе.

      Для измерения концентрации кокамидопропилбетаина использовали двухфазный (кислотно-основной) титрационный тест с лакмусовыми бумажками (индикаторная бумага Whatman, Camlab, Кембридж, Великобритания). Выделение парабенов из зубных паст и жидкостей для полоскания рта проводили с помощью газовой хроматографии (Shimadzu, Markham, Ontario, Canada).Лактат цинка и бензоат натрия выделяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ; серия Agilent Technologies 1200 Infinity, Санта-Клара, Калифорния, США). Помимо верхнего и нижнего пределов извлеченных концентраций шести ингредиентов, для оценки цитотоксичности каждого экспериментального материала использовали медиану, более высокую концентрацию и более низкую концентрацию (для большей точности).

      Клетки, использованные для теста на цитотоксичность:

      Клеточная линия HuGu фибробластов десны человека (HGF; Cell No.IBRC {«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«text»:»C10459″,»term_id»:»1535530″,»term_text»:»C10459″}}C10459), установленный из биопсии десны 45-летней женщины homo-sapien, были получены из банка клеток Иранского центра биологических ресурсов (IBRC). Культуральная среда состояла из модифицированной Дульбекко среды Игла (DMEM), 2 мМ L-глютамина и 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS). Среда для хранения включала 90 % FBS и 10 % диметилсульфоксида (ДМСО) в концентрации примерно 1×10. 6 клеток/флакон инкубировали при 37°C с 5% диоксидом углерода (CO 2 ).HGF прилипли ко дну культурального планшета. Таким образом, для отсоединения клеток использовали трипсин. В каждой лунке 96-луночного планшета требовалось 10 000 клеток на 100 мкл (около миллиона клеток).

      Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ):

      Анализ МТТ использовался для оценки цитотоксичности материалов. По сто мкл каждой клеточной суспензии добавляли в 96-луночный планшет и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажность от 12 до 24 часов для обеспечения прикрепления клеток.Затем в каждую лунку через указанный период добавляли чистые материалы (Merck, Rahway, NJ, USA) в соответствующих концентрациях плюс 10 мкл красителя МТТ. Три лунки, содержащие 100 мкл культуральной среды плюс 10 мкл МТТ, считали пустыми. Планшет накрывали алюминиевой фольгой и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажности в течение четырех часов. Наличие пурпурных отложений оценивали под инвертированным микроскопом. Затем из лунок удаляли культуральную среду (содержащую прикрепленные клетки) и в каждую лунку добавляли по 100 мкл ДМСО.Затем планшеты помещали в темноту на два-четыре часа и определяли оптическую плотность (ОП) лунок (как для экспериментальных, так и для пустых лунок) с помощью спектрофотометра (X-Rite, Гранд-Рапидс, Мичиган, США). на длине волны 570 нм. Результаты регистрировали для количественного сравнения пролиферации клеток. Все вышеперечисленные процедуры повторялись трижды. Это было сделано для всех шести ингредиентов в указанных концентрациях через 1, 15 и 30 минут после воздействия. Для этой цели использовали трехлуночные планшеты для трех повторов.Например, для материала с пятью концентрациями было выделено 15 лунок. Когда материал добавляли в лунку, фиксировали время и через минуту добавляли МТТ. Через одну минуту в каждую лунку добавляли 10 мкл МТТ в конечной концентрации 5 мг/мл. Остальные шаги были такими же, как упомянутые ранее. То же самое было сделано для оценок через 15 и 30 минут с той разницей, что МТТ добавляли в лунки через 15 и 30 минут после воздействия.

      Статистический анализ:

      Трехфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) использовали для оценки влияния времени, концентрации и типа ингредиента на цитотоксичность.Р<0,05 считалось статистически значимым.

      РЕЗУЛЬТАТЫ

      Концентрации экстрагированных ингредиентов, полученные с использованием соответствующих методов, были следующими (%: мг/100 мл дистиллированной воды):

        • NAF: 160-1400 PPM

        • Натрий Лаурилсульфат: 0,75-2,75%

        • Cocamidropyl Betaine: 1,5-4%

        • Зинк Лактат: 0,1-0,4%

        • Paraben: 0,01–0,1 %

        • Бензоат натрия: 0.1–0,3 %

        Концентрации, использованные для анализа МТТ, представлены в . Трехсторонний ANOVA показал значительную разницу в цитотоксичности парабена, лактата цинка и бензоата натрия (P<0,001). Кроме того, разница в цитотоксичности каждого материала через 1, 15 и 30 минут после воздействия была статистически значимой (P<0,001). Были отмечены значительные различия в цитотоксичности лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина и NaF во всех концентрациях через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

        Таблица 1:

        Концентрация шести ингредиентов, используемых для оценки цитотоксичности

        9 7
        Материалы Концентрации, используемые для оценки цитотоксичности
        Фторид натрия 1400 PPM 1400 1000 частей на миллион 400 частей на миллион 160 частей на миллион
        Лаурилсульфат натрия (%) 5.5 2 2.75 1.5 0.75 0.37
        Cocamidropopyl Betaine (%) 8 4 2 2 1.5 1
        0.6 0.6 0,2 0.2 0,1 0,05
        0,2 0.2 0,1 0,02 0,01 0.005
        натрия Бензоат (%) 0.6 0,3 0,15 0,1 0,03

        Результаты анализа МТТ для шести ингредиентов были следующими. , парабен и лактат цинка (P<0,001). Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую цитотоксичность, а парабен показал низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

        Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую, а парабен — низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,001). Во всех трех временных точках наибольшую цитотоксичность показал лаурилсульфат натрия, а наименьшую цитотоксичность показал NaF.

        Бензоат натрия, парабен и лактат цинка имели самую низкую цитотоксичность во всех трех временных точках.Цитотоксичность всех трех ингредиентов во всех концентрациях составляла менее 50%. Другими словами, бензоат натрия, парабен и лактат цинка устраняют менее 50% HGF.

        Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин во все моменты времени приводили к элиминации значительного процента клеток и обладали самой высокой цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF.

        Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено в .бетаин во все моменты времени приводил к элиминации значительного процента клеток и обладал наибольшей цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF. Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено на рис.

        Планка погрешности средних значений и 95% доверительный интервал (ДИ) среднего процента жизнеспособности клеток для различных концентраций исследуемых материалов через 1, 15 и 30 минут.

        ОБСУЖДЕНИЕ

        Все химические вещества, применяемые в ротовой полости, должны оцениваться с точки зрения цитотоксичности. Стоматологические материалы проходят различные испытания Американской стоматологической ассоциации (ADA), Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) и Международной организации по стандартизации (ISO). Один из основных тестов включает использование клеточной культуры для определения цитотоксического действия этих материалов. Тест МТТ основан на превращении бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия в кристаллы формазана жизнеспособными клетками.Поскольку в большинстве клеточных популяций общая митохондриальная активность зависит от количества жизнеспособных клеток, этот тест используют для оценки токсического действия лекарственных препаратов на клетки in vitro [2].

        Зубные пасты используются для ежедневного ухода за зубами; однако их влияние на клетки слизистой оболочки полости рта изучено недостаточно. Поскольку эти материалы находятся в непосредственном контакте со слизистой оболочкой, необходимо исследовать все их негативные эффекты [2]. В некоторых предыдущих исследованиях оценивалась цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта, а в некоторых из них сообщалось о токсичности зубных паст для клеток слизистой оболочки полости рта [2,4].

        Зубные пасты состоят из трех основных компонентов, включая (I) детергенты, такие как лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин, (II) нерастворимые абразивы для удаления зубного налета, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, и (III) кариостатические агенты, такие как соединения фтора (NaF и монофторфосфат натрия). Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин относятся к числу наиболее токсичных компонентов в составе зубных паст [2]. Другие вещества, добавляемые в зубные пасты для различных функций, включают десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции; каждый из этих агентов может оказывать токсическое действие [4].В дополнение к зубным пастам лактат цинка, парабен и бензоат натрия также добавляют в качестве антимикробных агентов и пищевых консервантов. В некоторых исследованиях оценивалась канцерогенность этих материалов, особенно парабенов [11,12].

        Поскольку любой из ингредиентов зубной пасты может оказывать токсическое воздействие на клетки слизистой оболочки полости рта, и ни одно из предыдущих исследований не сравнивало цитотоксичность ингредиентов зубной пасты и жидкости для полоскания рта при их стандартных концентрациях, в этом исследовании оценивалась цитотоксичность шести основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта по отношению к HGF, которые являются наиболее устойчивыми клетками к апоптозу и мутации.

        Cvikl et al. [4] оценили влияние ингредиентов зубной пасты на жизнеспособность клеток. Они оценили девять зубных паст с различными моющими средствами, подвергая HGF воздействию 1% концентрации этих зубных паст в течение двух минут. Они показали, что зубные пасты, содержащие лаурилсульфат натрия и фторид амина, сильно снижают жизнеспособность клеток, в то время как зубные пасты, содержащие кокамидопропилбетаин, оказывают меньшее влияние на жизнеспособность клеток [4]. Одним из недостатков цитируемого исследования было отсутствие внимания к времени как влиятельному фактору цитотоксичности, поскольку все тесты проводились через две минуты, и все материалы были признаны цитотоксичными.В нашем исследовании было обнаружено, что время оказывает значительное влияние на цитотоксичность, и цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина оценивали в трех временных точках и пяти концентрациях.

        В нашем исследовании цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина была самой высокой, что сходно с результатами Cvikl et al [4]. Эти два детергента обладают высокой цитотоксичностью вскоре после воздействия и даже при концентрациях намного ниже безопасного порога для использования в зубных пастах.В нашем исследовании цитотоксичность кокамидопропилбетаина была несколько меньше, чем у лаурилсульфата натрия.

        Jeng et al. [13] оценили цитотоксичность NaF в отношении фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. Результаты показали, что NaF в концентрациях 4 ммоль/л (80 частей на миллион) и выше токсичен для фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. NaF в концентрациях 4, 8 и 12 ммоль/л через два часа инкубации ингибировал активность митохондрий на 31, 56 и 57% соответственно [13].

        Их результаты отличались от наших.В настоящем исследовании цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем и увеличивалась со временем. Другими словами, концентрация NaF 1000 частей на миллион в течение одной минуты, 400 частей на миллион в течение 15 минут и 160 частей на миллион в течение 30 минут были нетоксичными, в то время как увеличение времени с одной минуты до 15 минут для концентрации 1000 частей на миллион и от От 15 до 30 минут для концентрации 400 частей на миллион повышали цитотоксичность в отношении HGF. Это может быть связано с разными методологиями.

        Torrado et al. [3] оценили цитотоксичность зубных паст Crest Extra Whitening и NMTD на фибробластах мыши с использованием анализа МТТ.Они сообщили, что ни одна из зубных паст не оказала существенного влияния на жизнеспособность клеток, а при увеличении времени инкубации значительно возрастала цитотоксичность [3].

        Все зубные пасты, включая Crest Extra Whitening, содержат значительное количество детергентов. В текущем исследовании было обнаружено, что даже самая низкая концентрация детергентов, используемых в зубных пастах, является цитотоксичной для HGF. Более того, эта цитотоксичность увеличивалась со временем. Основным недостатком исследования Torrado et al. [3] было то, что они оценивали цитотоксичность зубных паст с использованием мышиных фибробластов, что может быть причиной различий в результатах.

        Camargo et al. [14] сравнили цитотоксичность (анализ МТТ), оценили генетическую токсичность (путем наблюдения за изменениями в ядрах фибробластов хомяков) и оценили изменения шероховатости поверхности эмали, вызванные отбеливающими зубными пастами (Colgate и Oral- Б) и не отбеливающие зубные пасты. Цитотоксичность, генетическая токсичность и шероховатость поверхности, вызванные двумя отбеливающими зубными пастами, были выше, чем у других зубных паст. Также цитотоксичность Colgate Whitening была выше, чем у зубной пасты Oral-B [14].Их выводы относительно более высокой цитотоксичности отбеливающих средств по сравнению с не отбеливающими зубными пастами согласуются с нашими результатами. Отбеливающие зубные пасты содержат большее количество лаурилсульфата натрия, и, согласно нашим результатам, лаурилсульфат натрия обладает самой высокой цитотоксичностью среди шести основных ингредиентов зубных паст и отвечает за более высокую цитотоксичность отбеливающих зубных паст.

        Цай и др. [15] оценили влияние бензоата натрия на личинок одного типа рыб и сообщили, что концентрация бензоата натрия 2000 ppm была высокотоксичной для личинок; 1400-1500 ppm бензоата натрия вызывали гибель более 50% личинок.Они также показали, что бензоат натрия более токсичен для мышечных клеток и нейронов [15].

        Бензоат натрия используется в пищевых продуктах, косметике и средствах гигиены в качестве консерванта. Вышеупомянутое исследование выявило цитотоксичность концентрации бензоата натрия > 1400 ppm для мышечных клеток и нейронов, независимо от его безопасной концентрации для использования в пищевых продуктах, косметике и гигиенических продуктах [15]. Однако наши результаты показали, что бензоат натрия в стандартных концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не был токсичен для HGF.

        Харви и Эверетт [16] оценили роль парабенов в развитии рака молочной железы. Они обнаружили большое количество парабена в резецированных опухолевых тканях и заявили, что парабен может играть роль в увеличении частоты рака молочной железы [16].

        Отрицательное и канцерогенное воздействие консервантов, таких как парабены, в продуктах питания, косметике и средствах гигиены ранее было задокументировано. Эти эффекты в основном обусловлены длительным (в течение многих лет) контактом с веществами, содержащими парабен, и его накопительным действием, что в конечном итоге вызывает рак у человека [16].

        В текущем исследовании парабены в концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не оказывали токсического действия на HGF через 1, 15 и 30 минут. Однако необходимы дальнейшие исследования неблагоприятных системных эффектов и канцерогенеза других концентраций парабенов при более длительном воздействии. Нг и др. [17] оценили цитотоксичность и генетическую токсичность оксида цинка для фибробластов легких человека и плодовой мухи in vitro и in vivo. Они заметили, что оксид цинка вызывает гибель фибробластов легких человека.Более того, окислительный стресс вызвал повреждение ДНК в этих клетках. Оксид цинка значительно увеличивал смертность дрозофил в период их развития от вылупления до половозрелости [17].

        В текущем исследовании цитотоксичность лактата цинка оценивалась вместо оксида цинка из-за важной роли лактата цинка и его антибактериальной активности в зубных пастах. В исследовании Ng et al. [17] не учитывалась концентрация оксида цинка или время воздействия при оценке токсичности.Кроме того, несмотря на очень схожую химическую активность и токсическое действие оксида цинка и лактата цинка, цитотоксические эффекты оксида цинка, о которых сообщалось в цитируемом исследовании, были намного выше, чем у лактата цинка в нашем исследовании, что может быть связано с тем, что они не учитывали концентрация вещества и продолжительность воздействия. Кроме того, в двух исследованиях оценивали различные типы клеток (фибробласты легких человека по сравнению с HGF).

        ЗАКЛЮЧЕНИЕ

        В рамках ограничений данного исследования можно сделать следующие выводы:

        1. Цитотоксичность NaF при концентрации 1400 частей на миллион (максимальная концентрация, используемая в зубных пастах) через одну минуту составила 53%, тогда как его цитотоксичность при концентрации 160 частей на миллион (минимальная концентрация, используемая в зубных пастах и ​​ополаскивателях) составляла 25%.Цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем; через 30 минут цитотоксичность концентрации NaF 160 ppm увеличилась до 50%. Самая высокая цитотоксичность NaF составила 71% (1400 ppm за 30 минут).

        2. Порог концентрации фтора 400 ppm; он не был токсичен для HGF через 1, 15 и 30 минут воздействия.

        3. Лаурилсульфат натрия обладал самой высокой цитотоксичностью во всех временных точках и показал >90% токсичности при всех концентрациях.

        4. Кокамидопропилбетаин обладает цитотоксичностью от 85% до 97%. Обладал самой высокой цитотоксичностью после лаурилсульфата натрия. Его цитотоксичность имела значительную корреляцию со временем и концентрацией; при увеличении концентрации и времени цитотоксичность возрастала.

        5. При увеличении концентрации лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта повышалась.

        6. Бензоат натрия и парабен показали самую низкую цитотоксичность.Кроме того, 0,6% концентрация бензоата натрия через 30 минут (30% цитотоксичность) и 0,2% концентрация парабена через 30 минут (40% цитотоксичность) показали самую высокую цитотоксичность.

        БЛАГОДАРНОСТЬ

        Мы хотели бы выразить нашу огромную признательность доктору Пуяну Аминишакиб, доценту кафедры оральной и челюстно-лицевой патологии Школы стоматологии Тегеранского университета медицинских наук.

        Сноски

        ЗАЯВЛЕНИЕ О КОНФЛИКТЕ ИНТЕРЕСОВ

        Не заявлено

        ССЫЛКИ

        1.Бинни А., Адди М., Ньюкомб Р.Г. Эффекты удаления зубного налета при однократном полоскании и чистке щеткой. J Пародонтол. 1993. Март; 64( 3): 181– 5. [PubMed] [Google Scholar]2. Гапанчи Дж., Камали Ф., Моаттари А., Пуршахиди С., Шахин Э., Резазаде Ф. и др. Сравнение in vitro цитотоксического и антибактериального действия 16 коммерческих зубных паст. J Int Здоровье полости рта. 2015. Март; 7( 3): 39– 43. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Торрадо А., Валиенте М., Чжан В., Ли Ю., Муньос К.А. Цитотоксичность новой зубной пасты на основе смеси ионообменных смол.Эм Джей Дент. 2005. Август; 18( 4): 267– 9. [PubMed] [Google Scholar]4. Цвикл Б., Лусси А., Грубер Р. Влияние экстрактов зубной пасты in vitro на жизнеспособность клеток. Eur J Oral Sci. 2015. Июнь; 123( 3): 179– 85. [PubMed] [Google Scholar]5. Барбье О., Арреола-Мендоса Л., Дель Разо Л.М. Молекулярные механизмы фторидной токсичности. Химическое биологическое взаимодействие. 2010. ноябрь 5; 188( 2): 319– 33. [PubMed] [Google Scholar]6. Риттер А.В., Эйдсон Р.С., Донован Т.Е. Кариес зубов: этиология, клинические характеристики, оценка риска и лечение.В: Хейманн Х.О., Свифт Э.Дж., Риттер А.В. (редакторы). Стердеванта «Искусство и наука оперативной стоматологии». Эльзевир/Мосби, Сент-Луис, Миссури, 2013: 41– 88. [Google Академия]7. Хили К.М., Крачли А.Т., Торнхилл М.Х., Уильямс Д.М. Влияние лаурилсульфата натрия, триклозана и цинка на проницаемость нормальной слизистой оболочки полости рта. Оральный Дис. 2000. Март; 6( 2): 118– 23. [PubMed] [Google Scholar]8. Херлофсон Б.Б., Бродин П., Аарс Х. Увеличение кровотока в деснах человека, вызванное лаурилсульфатом натрия. Дж. Клин Пародонтол.1996. ноябрь; 23( 11): 1004– 7. [PubMed] [Google Scholar]9. Харасти В.И., Замбон Дж.Дж., Шринивасан П.К. Оценка противомикробной активности средств для ухода за зубами на бактериях ротовой полости человека. Джей Клин Дент. 2010 г.; 21( 4): 96– 100. [PubMed] [Google Scholar] 10. Новак К, Ратайчак-Врона В, Гурска М, Яблонска Э. Парабены и их влияние на эндокринную систему. Мол Селл Эндокринол. 2018. Октябрь 15; 474: 238– 251. [PubMed] [Google Scholar] 11. Наир Б. Заключительный отчет по оценке безопасности бензилового спирта, бензойной кислоты и бензоата натрия.Int J Toxicol. 2001 г.; 20 Приложение 3: 23– 50. [PubMed] [Google Scholar] 12. Park YD, Jang JH, Park JE, Kim JH, Kim EC, Song YJ и др. Анализ парабенов в средствах для ухода за зубами и полости рта. Биомед Хроматогр. 2014. Декабрь; 28( 12): 1692– 700. [PubMed] [Google Scholar] 13. Jeng JH, Hsieh CC, Lan WH, Chang MC, Lin SK, Hahn LJ, et al. Цитотоксичность фторида натрия на фибробластах слизистой оболочки полости рта человека и ее механизмы. Клеточный Биол Токсикол. 1998. Декабрь; 14( 6): 383– 9. [PubMed] [Google Scholar] 14.Камарго С.Е., Хояс Р.П., Сантана-Мело Г.Ф., Феррейра Л.Т., Эль Ачкар В.Н., Роде Сде М. Обычные и отбеливающие зубные пасты: цитотоксичность, генотоксичность и влияние на поверхность эмали. Эм Джей Дент. 2014. Декабрь; 27( 6): 307– 11. [PubMed] [Google Scholar] 15. Tsay HJ, Wang YH, Chen WL, Huang MY, Chen YH. Лечение бензоатом натрия приводит к уродству личинок рыбок данио. Нейротоксикол Тератол. 2007. сентябрь-октябрь; 29( 5): 562– 9. [PubMed] [Google Scholar] 16. Харви П.В., Эверетт Д.Дж. Значение обнаружения эфиров п-гидроксибензойной кислоты (парабенов) в опухолях молочной железы человека.J Appl Toxicol. 2004. январь-февраль; 24( 1): 1– 4. [PubMed] [Google Scholar] 17. Ng CT, Yong LQ, Hande MP, Ong CN, Yu LE, Bay BH и соавт. Наночастицы оксида цинка проявляют цитотоксичность и генотоксичность в ответ на окислительный стресс в фибробластах легких человека и Drosophila melanogaster. Int J Наномедицина. 2017. февраль 28; 12: 1621– 1637. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

        Цитотоксичность ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта на фибробластах десны человека

        Front Dent.2019 ноябрь-декабрь; 16(6): 450–457. Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран , Иран

        Фарзане Садеги Махунак

        2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

        Нафисе Асгари

        3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

        Зохре Моради

        1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

        2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

        1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

        2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

        3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

        * Автор, ответственный за переписку : Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран, электронная почта: [email protected]

        Поступила в редакцию 26 мая 2019 г.; Принято 1 сентября 2019 г.

        Авторское право © Стоматологический исследовательский центр Тегеранского университета медицинских наук. Эта работа опубликована в виде статьи с открытым доступом, распространяемой на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4). Некоммерческое использование работы разрешено при условии правильного цитирования оригинальной работы. Эта статья цитировалась другими статьями в PMC.

        Abstract

        Цели:

        Зубные пасты и жидкости для полоскания рта содержат ингредиенты, которые могут быть токсичными для тканей слизистой оболочки полости рта.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта.

        Материалы и методы:

        Это экспериментальное исследование было проведено на 16 зубных пастах и ​​четырех ополаскивателях для полости рта, широко доступных на иранском рынке. Во-первых, была определена концентрация шести основных ингредиентов этих продуктов, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия. Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ) использовали для оценки цитотоксичности этих материалов в отношении фибробластов десны человека (HGF).Анализ МТТ проводили через 1, 15 и 30 минут после воздействия пяти концентраций каждого материала в трех экземплярах (в соответствии с концентрациями, полученными на этапе выделения). Данные анализировали с использованием трехфакторного дисперсионного анализа (ANOVA).

        Результаты:

        Разница в цитотоксичности материалов была статистически значимой (P<0,001). Цитотоксичность зависела от времени и концентрации; при увеличении концентрации материалов их цитотоксичность со временем увеличивалась.Цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина составляла >90%. Цитотоксичность NaF варьировала от 25% до 70%, а цитотоксичность всех концентраций лактата цинка и бензоата натрия составляла <50% для HGF.

        Заключение:

        Для снижения цитотоксического действия зубных паст лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин следует заменить более безопасными детергентами, а концентрацию фтора снизить до 400 частей на миллион (ppm). В качестве альтернативы фторид можно заменить другими антибактериальными и кариостатическими агентами.

        Ключевые слова: Тесты на цитотоксичность, иммунологические; Фторид натрия; додецилсульфат натрия; кокамидопропилбетаин; цинк; парабены; Бензоат натрия

        ВВЕДЕНИЕ

        Механическое удаление зубного налета является наиболее часто используемым методом поддержания гигиены полости рта и здоровья десен. Зубные пасты и жидкости для полоскания рта обычно используются в качестве дополнения к механическому удалению зубного налета [1].

        Здоровье полости рта существенно влияет на качество жизни. Таким образом, необходимость экономически эффективных, безопасных и эффективных мер гигиены полости рта была особо подчеркнута.Чистка зубов с использованием подходящей зубной пасты является наиболее эффективным методом укрепления здоровья полости рта, устранения биопленок и снижения риска развития гингивита [1].

        Зубные пасты обладают антибактериальными свойствами и уменьшают возникновение заболеваний, связанных с зубным налетом. Однако в них имеются добавки с возможным токсическим действием на слизистую оболочку полости рта [2, 3]. Зубные пасты содержат три основных ингредиента: фтор, абразивы и моющие средства [4]. Фтор добавляют в зубные пасты для придания им кариостатических свойств; однако он оказывает токсическое действие на все типы клеток.Эти эффекты различаются для разных типов клеток в зависимости от продолжительности воздействия и концентрации фтора. Сообщалось о некрозе как основном механизме гибели клеток после воздействия относительно высоких концентраций фтора [5]. Кроме того, воздействие высоких концентраций фтора [10 частей на миллион (млн) и выше] часто приводит к флюорозу, который характеризуется коричневатым изменением цвета эмали, приводящим к пятнистости эмали [6]. Абразивные вещества, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, также добавляют в зубные пасты для придания свойства удаления зубного налета.Бензоат натрия и парабены используются в качестве консервантов в зубных пастах [4].

        Моющие средства, присутствующие в составе зубных паст, включают лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин. Лаурилсульфат натрия показал значительные токсические эффекты in vitro [4]. Он может изменять белки слизистой оболочки полости рта in vitro [7] и увеличивать кровоток в деснах [8]. Лактат цинка является еще одним ингредиентом зубных паст с антимикробными свойствами [9]. В зубные пасты также добавляют десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции, которые могут оказывать токсическое действие [4].Например, парабен влияет на эндокринную систему и нарушает выработку гормонов. Он также канцерогенен [10]. Бензоат натрия может вызывать анафилактический шок, отек слизистой оболочки носа и одышку [10]. Лактат цинка также используется в составе зубных паст и может негативно влиять на дыхательную систему [10]. Кокамидопропилбетаин используется в составе зубных паст в качестве пенообразователя и может вызывать аллергические реакции [10].

        Предыдущие исследования теоретически показали токсичность этих материалов; однако не определена конкретная концентрация в качестве порога цитотоксичности этих агентов.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта, обычно доступных на иранском рынке. Цитотоксичность различных ингредиентов сравнивали, чтобы найти материал с самой высокой цитотоксичностью.

        МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

        В этом экспериментальном исследовании in vitro использовались шестнадцать зубных паст, а именно Sanino kids (Evyap, Стамбул, Турция), Sehat (Sehat Co., Тегеран, Иран), Oral-B PRO-EXPERT (Procter & Gamble). Co., Цинциннати, Огайо, США), Crest 7 Complete (Procter & Gamble Co., Цинциннати, Огайо, США), Colgate (Colgate Palmolive Co., Пискатауэй, Нью-Джерси, США), Crend 3 (Pakrokh Cosmetic and Hygienic Co., Тегеран, Иран), Pooneh (Паксан, Тегеран, Иран), Parodontax GUM CARE ( GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Close Up (Юнилевер, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Nasim (Паксан, Тегеран, Иран), Sensodyne (GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Bath (Iran Avandfar Co. Ltd. , Альборз, Иран), Signal (Unilever, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Himalaya Complete Care (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия), Himalaya Sparkling White (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия) и 4 средства для полоскания рта, а именно Irsha ( Shafa Cosmetic Laboratories Co., Тегеран, Иран), Oral-B (Grossgerau Co., Гессен, Германия), Vi-One (Rojn Cosmetic Lab. Co., Тебриз, Иран) и Listerine (Pfizer Inc., Моррис-Плейнс, Нью-Джерси, США). обычно доступные на иранском рынке, были оценены для определения концентрации шести основных ингредиентов в их составе, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия.

        Концентрацию NaF в составе зубных паст и ополаскивателей определяли методом потенциометрического титрования.

        Выделение лаурилсульфата натрия проводили с использованием активного анионного теста, основанного на стехиометрических реакциях между анионным поверхностно-активным веществом и стандартным раствором амина, приводящих к образованию родственного комплекса в органической фазе.

        Для измерения концентрации кокамидопропилбетаина использовали двухфазный (кислотно-основной) титрационный тест с лакмусовыми бумажками (индикаторная бумага Whatman, Camlab, Кембридж, Великобритания). Выделение парабенов из зубных паст и жидкостей для полоскания рта проводили с помощью газовой хроматографии (Shimadzu, Markham, Ontario, Canada).Лактат цинка и бензоат натрия выделяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ; серия Agilent Technologies 1200 Infinity, Санта-Клара, Калифорния, США). Помимо верхнего и нижнего пределов извлеченных концентраций шести ингредиентов, для оценки цитотоксичности каждого экспериментального материала использовали медиану, более высокую концентрацию и более низкую концентрацию (для большей точности).

        Клетки, использованные для теста на цитотоксичность:

        Клеточная линия HuGu фибробластов десны человека (HGF; Cell No.IBRC {«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«text»:»C10459″,»term_id»:»1535530″,»term_text»:»C10459″}}C10459), установленный из биопсии десны 45-летней женщины homo-sapien, были получены из банка клеток Иранского центра биологических ресурсов (IBRC). Культуральная среда состояла из модифицированной Дульбекко среды Игла (DMEM), 2 мМ L-глютамина и 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS). Среда для хранения включала 90 % FBS и 10 % диметилсульфоксида (ДМСО) в концентрации примерно 1×10. 6 клеток/флакон инкубировали при 37°C с 5% диоксидом углерода (CO 2 ).HGF прилипли ко дну культурального планшета. Таким образом, для отсоединения клеток использовали трипсин. В каждой лунке 96-луночного планшета требовалось 10 000 клеток на 100 мкл (около миллиона клеток).

        Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ):

        Анализ МТТ использовался для оценки цитотоксичности материалов. По сто мкл каждой клеточной суспензии добавляли в 96-луночный планшет и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажность от 12 до 24 часов для обеспечения прикрепления клеток.Затем в каждую лунку через указанный период добавляли чистые материалы (Merck, Rahway, NJ, USA) в соответствующих концентрациях плюс 10 мкл красителя МТТ. Три лунки, содержащие 100 мкл культуральной среды плюс 10 мкл МТТ, считали пустыми. Планшет накрывали алюминиевой фольгой и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажности в течение четырех часов. Наличие пурпурных отложений оценивали под инвертированным микроскопом. Затем из лунок удаляли культуральную среду (содержащую прикрепленные клетки) и в каждую лунку добавляли по 100 мкл ДМСО.Затем планшеты помещали в темноту на два-четыре часа и определяли оптическую плотность (ОП) лунок (как для экспериментальных, так и для пустых лунок) с помощью спектрофотометра (X-Rite, Гранд-Рапидс, Мичиган, США). на длине волны 570 нм. Результаты регистрировали для количественного сравнения пролиферации клеток. Все вышеперечисленные процедуры повторялись трижды. Это было сделано для всех шести ингредиентов в указанных концентрациях через 1, 15 и 30 минут после воздействия. Для этой цели использовали трехлуночные планшеты для трех повторов.Например, для материала с пятью концентрациями было выделено 15 лунок. Когда материал добавляли в лунку, фиксировали время и через минуту добавляли МТТ. Через одну минуту в каждую лунку добавляли 10 мкл МТТ в конечной концентрации 5 мг/мл. Остальные шаги были такими же, как упомянутые ранее. То же самое было сделано для оценок через 15 и 30 минут с той разницей, что МТТ добавляли в лунки через 15 и 30 минут после воздействия.

        Статистический анализ:

        Трехфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) использовали для оценки влияния времени, концентрации и типа ингредиента на цитотоксичность.Р<0,05 считалось статистически значимым.

        РЕЗУЛЬТАТЫ

        Концентрации экстрагированных ингредиентов, полученные с использованием соответствующих методов, были следующими (%: мг/100 мл дистиллированной воды):

          • NAF: 160-1400 PPM

          • Натрий Лаурилсульфат: 0,75-2,75%

          • Cocamidropyl Betaine: 1,5-4%

          • Зинк Лактат: 0,1-0,4%

          • Paraben: 0,01–0,1 %

          • Бензоат натрия: 0.1–0,3 %

          Концентрации, использованные для анализа МТТ, представлены в . Трехсторонний ANOVA показал значительную разницу в цитотоксичности парабена, лактата цинка и бензоата натрия (P<0,001). Кроме того, разница в цитотоксичности каждого материала через 1, 15 и 30 минут после воздействия была статистически значимой (P<0,001). Были отмечены значительные различия в цитотоксичности лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина и NaF во всех концентрациях через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

          Таблица 1:

          Концентрация шести ингредиентов, используемых для оценки цитотоксичности

          9 7
          Материалы Концентрации, используемые для оценки цитотоксичности
          Фторид натрия 1400 PPM 1400 1000 частей на миллион 400 частей на миллион 160 частей на миллион
          Лаурилсульфат натрия (%) 5.5 2 2.75 1.5 0.75 0.37
          Cocamidropopyl Betaine (%) 8 4 2 2 1.5 1
          0.6 0.6 0,2 0.2 0,1 0,05
          0,2 0.2 0,1 0,02 0,01 0.005
          натрия Бензоат (%) 0.6 0,3 0,15 0,1 0,03

          Результаты анализа МТТ для шести ингредиентов были следующими. , парабен и лактат цинка (P<0,001). Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую цитотоксичность, а парабен показал низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

          Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую, а парабен — низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,001). Во всех трех временных точках наибольшую цитотоксичность показал лаурилсульфат натрия, а наименьшую цитотоксичность показал NaF.

          Бензоат натрия, парабен и лактат цинка имели самую низкую цитотоксичность во всех трех временных точках.Цитотоксичность всех трех ингредиентов во всех концентрациях составляла менее 50%. Другими словами, бензоат натрия, парабен и лактат цинка устраняют менее 50% HGF.

          Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин во все моменты времени приводили к элиминации значительного процента клеток и обладали самой высокой цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF.

          Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено в .бетаин во все моменты времени приводил к элиминации значительного процента клеток и обладал наибольшей цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF. Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено на рис.

          Планка погрешности средних значений и 95% доверительный интервал (ДИ) среднего процента жизнеспособности клеток для различных концентраций исследуемых материалов через 1, 15 и 30 минут.

          ОБСУЖДЕНИЕ

          Все химические вещества, применяемые в ротовой полости, должны оцениваться с точки зрения цитотоксичности. Стоматологические материалы проходят различные испытания Американской стоматологической ассоциации (ADA), Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) и Международной организации по стандартизации (ISO). Один из основных тестов включает использование клеточной культуры для определения цитотоксического действия этих материалов. Тест МТТ основан на превращении бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия в кристаллы формазана жизнеспособными клетками.Поскольку в большинстве клеточных популяций общая митохондриальная активность зависит от количества жизнеспособных клеток, этот тест используют для оценки токсического действия лекарственных препаратов на клетки in vitro [2].

          Зубные пасты используются для ежедневного ухода за зубами; однако их влияние на клетки слизистой оболочки полости рта изучено недостаточно. Поскольку эти материалы находятся в непосредственном контакте со слизистой оболочкой, необходимо исследовать все их негативные эффекты [2]. В некоторых предыдущих исследованиях оценивалась цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта, а в некоторых из них сообщалось о токсичности зубных паст для клеток слизистой оболочки полости рта [2,4].

          Зубные пасты состоят из трех основных компонентов, включая (I) детергенты, такие как лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин, (II) нерастворимые абразивы для удаления зубного налета, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, и (III) кариостатические агенты, такие как соединения фтора (NaF и монофторфосфат натрия). Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин относятся к числу наиболее токсичных компонентов в составе зубных паст [2]. Другие вещества, добавляемые в зубные пасты для различных функций, включают десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции; каждый из этих агентов может оказывать токсическое действие [4].В дополнение к зубным пастам лактат цинка, парабен и бензоат натрия также добавляют в качестве антимикробных агентов и пищевых консервантов. В некоторых исследованиях оценивалась канцерогенность этих материалов, особенно парабенов [11,12].

          Поскольку любой из ингредиентов зубной пасты может оказывать токсическое воздействие на клетки слизистой оболочки полости рта, и ни одно из предыдущих исследований не сравнивало цитотоксичность ингредиентов зубной пасты и жидкости для полоскания рта при их стандартных концентрациях, в этом исследовании оценивалась цитотоксичность шести основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта по отношению к HGF, которые являются наиболее устойчивыми клетками к апоптозу и мутации.

          Cvikl et al. [4] оценили влияние ингредиентов зубной пасты на жизнеспособность клеток. Они оценили девять зубных паст с различными моющими средствами, подвергая HGF воздействию 1% концентрации этих зубных паст в течение двух минут. Они показали, что зубные пасты, содержащие лаурилсульфат натрия и фторид амина, сильно снижают жизнеспособность клеток, в то время как зубные пасты, содержащие кокамидопропилбетаин, оказывают меньшее влияние на жизнеспособность клеток [4]. Одним из недостатков цитируемого исследования было отсутствие внимания к времени как влиятельному фактору цитотоксичности, поскольку все тесты проводились через две минуты, и все материалы были признаны цитотоксичными.В нашем исследовании было обнаружено, что время оказывает значительное влияние на цитотоксичность, и цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина оценивали в трех временных точках и пяти концентрациях.

          В нашем исследовании цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина была самой высокой, что сходно с результатами Cvikl et al [4]. Эти два детергента обладают высокой цитотоксичностью вскоре после воздействия и даже при концентрациях намного ниже безопасного порога для использования в зубных пастах.В нашем исследовании цитотоксичность кокамидопропилбетаина была несколько меньше, чем у лаурилсульфата натрия.

          Jeng et al. [13] оценили цитотоксичность NaF в отношении фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. Результаты показали, что NaF в концентрациях 4 ммоль/л (80 частей на миллион) и выше токсичен для фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. NaF в концентрациях 4, 8 и 12 ммоль/л через два часа инкубации ингибировал активность митохондрий на 31, 56 и 57% соответственно [13].

          Их результаты отличались от наших.В настоящем исследовании цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем и увеличивалась со временем. Другими словами, концентрация NaF 1000 частей на миллион в течение одной минуты, 400 частей на миллион в течение 15 минут и 160 частей на миллион в течение 30 минут были нетоксичными, в то время как увеличение времени с одной минуты до 15 минут для концентрации 1000 частей на миллион и от От 15 до 30 минут для концентрации 400 частей на миллион повышали цитотоксичность в отношении HGF. Это может быть связано с разными методологиями.

          Torrado et al. [3] оценили цитотоксичность зубных паст Crest Extra Whitening и NMTD на фибробластах мыши с использованием анализа МТТ.Они сообщили, что ни одна из зубных паст не оказала существенного влияния на жизнеспособность клеток, а при увеличении времени инкубации значительно возрастала цитотоксичность [3].

          Все зубные пасты, включая Crest Extra Whitening, содержат значительное количество детергентов. В текущем исследовании было обнаружено, что даже самая низкая концентрация детергентов, используемых в зубных пастах, является цитотоксичной для HGF. Более того, эта цитотоксичность увеличивалась со временем. Основным недостатком исследования Torrado et al. [3] было то, что они оценивали цитотоксичность зубных паст с использованием мышиных фибробластов, что может быть причиной различий в результатах.

          Camargo et al. [14] сравнили цитотоксичность (анализ МТТ), оценили генетическую токсичность (путем наблюдения за изменениями в ядрах фибробластов хомяков) и оценили изменения шероховатости поверхности эмали, вызванные отбеливающими зубными пастами (Colgate и Oral- Б) и не отбеливающие зубные пасты. Цитотоксичность, генетическая токсичность и шероховатость поверхности, вызванные двумя отбеливающими зубными пастами, были выше, чем у других зубных паст. Также цитотоксичность Colgate Whitening была выше, чем у зубной пасты Oral-B [14].Их выводы относительно более высокой цитотоксичности отбеливающих средств по сравнению с не отбеливающими зубными пастами согласуются с нашими результатами. Отбеливающие зубные пасты содержат большее количество лаурилсульфата натрия, и, согласно нашим результатам, лаурилсульфат натрия обладает самой высокой цитотоксичностью среди шести основных ингредиентов зубных паст и отвечает за более высокую цитотоксичность отбеливающих зубных паст.

          Цай и др. [15] оценили влияние бензоата натрия на личинок одного типа рыб и сообщили, что концентрация бензоата натрия 2000 ppm была высокотоксичной для личинок; 1400-1500 ppm бензоата натрия вызывали гибель более 50% личинок.Они также показали, что бензоат натрия более токсичен для мышечных клеток и нейронов [15].

          Бензоат натрия используется в пищевых продуктах, косметике и средствах гигиены в качестве консерванта. Вышеупомянутое исследование выявило цитотоксичность концентрации бензоата натрия > 1400 ppm для мышечных клеток и нейронов, независимо от его безопасной концентрации для использования в пищевых продуктах, косметике и гигиенических продуктах [15]. Однако наши результаты показали, что бензоат натрия в стандартных концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не был токсичен для HGF.

          Харви и Эверетт [16] оценили роль парабенов в развитии рака молочной железы. Они обнаружили большое количество парабена в резецированных опухолевых тканях и заявили, что парабен может играть роль в увеличении частоты рака молочной железы [16].

          Отрицательное и канцерогенное воздействие консервантов, таких как парабены, в продуктах питания, косметике и средствах гигиены ранее было задокументировано. Эти эффекты в основном обусловлены длительным (в течение многих лет) контактом с веществами, содержащими парабен, и его накопительным действием, что в конечном итоге вызывает рак у человека [16].

          В текущем исследовании парабены в концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не оказывали токсического действия на HGF через 1, 15 и 30 минут. Однако необходимы дальнейшие исследования неблагоприятных системных эффектов и канцерогенеза других концентраций парабенов при более длительном воздействии. Нг и др. [17] оценили цитотоксичность и генетическую токсичность оксида цинка для фибробластов легких человека и плодовой мухи in vitro и in vivo. Они заметили, что оксид цинка вызывает гибель фибробластов легких человека.Более того, окислительный стресс вызвал повреждение ДНК в этих клетках. Оксид цинка значительно увеличивал смертность дрозофил в период их развития от вылупления до половозрелости [17].

          В текущем исследовании цитотоксичность лактата цинка оценивалась вместо оксида цинка из-за важной роли лактата цинка и его антибактериальной активности в зубных пастах. В исследовании Ng et al. [17] не учитывалась концентрация оксида цинка или время воздействия при оценке токсичности.Кроме того, несмотря на очень схожую химическую активность и токсическое действие оксида цинка и лактата цинка, цитотоксические эффекты оксида цинка, о которых сообщалось в цитируемом исследовании, были намного выше, чем у лактата цинка в нашем исследовании, что может быть связано с тем, что они не учитывали концентрация вещества и продолжительность воздействия. Кроме того, в двух исследованиях оценивали различные типы клеток (фибробласты легких человека по сравнению с HGF).

          ЗАКЛЮЧЕНИЕ

          В рамках ограничений данного исследования можно сделать следующие выводы:

          1. Цитотоксичность NaF при концентрации 1400 частей на миллион (максимальная концентрация, используемая в зубных пастах) через одну минуту составила 53%, тогда как его цитотоксичность при концентрации 160 частей на миллион (минимальная концентрация, используемая в зубных пастах и ​​ополаскивателях) составляла 25%.Цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем; через 30 минут цитотоксичность концентрации NaF 160 ppm увеличилась до 50%. Самая высокая цитотоксичность NaF составила 71% (1400 ppm за 30 минут).

          2. Порог концентрации фтора 400 ppm; он не был токсичен для HGF через 1, 15 и 30 минут воздействия.

          3. Лаурилсульфат натрия обладал самой высокой цитотоксичностью во всех временных точках и показал >90% токсичности при всех концентрациях.

          4. Кокамидопропилбетаин обладает цитотоксичностью от 85% до 97%. Обладал самой высокой цитотоксичностью после лаурилсульфата натрия. Его цитотоксичность имела значительную корреляцию со временем и концентрацией; при увеличении концентрации и времени цитотоксичность возрастала.

          5. При увеличении концентрации лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта повышалась.

          6. Бензоат натрия и парабен показали самую низкую цитотоксичность.Кроме того, 0,6% концентрация бензоата натрия через 30 минут (30% цитотоксичность) и 0,2% концентрация парабена через 30 минут (40% цитотоксичность) показали самую высокую цитотоксичность.

          БЛАГОДАРНОСТЬ

          Мы хотели бы выразить нашу огромную признательность доктору Пуяну Аминишакиб, доценту кафедры оральной и челюстно-лицевой патологии Школы стоматологии Тегеранского университета медицинских наук.

          Сноски

          ЗАЯВЛЕНИЕ О КОНФЛИКТЕ ИНТЕРЕСОВ

          Не заявлено

          ССЫЛКИ

          1.Бинни А., Адди М., Ньюкомб Р.Г. Эффекты удаления зубного налета при однократном полоскании и чистке щеткой. J Пародонтол. 1993. Март; 64( 3): 181– 5. [PubMed] [Google Scholar]2. Гапанчи Дж., Камали Ф., Моаттари А., Пуршахиди С., Шахин Э., Резазаде Ф. и др. Сравнение in vitro цитотоксического и антибактериального действия 16 коммерческих зубных паст. J Int Здоровье полости рта. 2015. Март; 7( 3): 39– 43. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Торрадо А., Валиенте М., Чжан В., Ли Ю., Муньос К.А. Цитотоксичность новой зубной пасты на основе смеси ионообменных смол.Эм Джей Дент. 2005. Август; 18( 4): 267– 9. [PubMed] [Google Scholar]4. Цвикл Б., Лусси А., Грубер Р. Влияние экстрактов зубной пасты in vitro на жизнеспособность клеток. Eur J Oral Sci. 2015. Июнь; 123( 3): 179– 85. [PubMed] [Google Scholar]5. Барбье О., Арреола-Мендоса Л., Дель Разо Л.М. Молекулярные механизмы фторидной токсичности. Химическое биологическое взаимодействие. 2010. ноябрь 5; 188( 2): 319– 33. [PubMed] [Google Scholar]6. Риттер А.В., Эйдсон Р.С., Донован Т.Е. Кариес зубов: этиология, клинические характеристики, оценка риска и лечение.В: Хейманн Х.О., Свифт Э.Дж., Риттер А.В. (редакторы). Стердеванта «Искусство и наука оперативной стоматологии». Эльзевир/Мосби, Сент-Луис, Миссури, 2013: 41– 88. [Google Академия]7. Хили К.М., Крачли А.Т., Торнхилл М.Х., Уильямс Д.М. Влияние лаурилсульфата натрия, триклозана и цинка на проницаемость нормальной слизистой оболочки полости рта. Оральный Дис. 2000. Март; 6( 2): 118– 23. [PubMed] [Google Scholar]8. Херлофсон Б.Б., Бродин П., Аарс Х. Увеличение кровотока в деснах человека, вызванное лаурилсульфатом натрия. Дж. Клин Пародонтол.1996. ноябрь; 23( 11): 1004– 7. [PubMed] [Google Scholar]9. Харасти В.И., Замбон Дж.Дж., Шринивасан П.К. Оценка противомикробной активности средств для ухода за зубами на бактериях ротовой полости человека. Джей Клин Дент. 2010 г.; 21( 4): 96– 100. [PubMed] [Google Scholar] 10. Новак К, Ратайчак-Врона В, Гурска М, Яблонска Э. Парабены и их влияние на эндокринную систему. Мол Селл Эндокринол. 2018. Октябрь 15; 474: 238– 251. [PubMed] [Google Scholar] 11. Наир Б. Заключительный отчет по оценке безопасности бензилового спирта, бензойной кислоты и бензоата натрия.Int J Toxicol. 2001 г.; 20 Приложение 3: 23– 50. [PubMed] [Google Scholar] 12. Park YD, Jang JH, Park JE, Kim JH, Kim EC, Song YJ и др. Анализ парабенов в средствах для ухода за зубами и полости рта. Биомед Хроматогр. 2014. Декабрь; 28( 12): 1692– 700. [PubMed] [Google Scholar] 13. Jeng JH, Hsieh CC, Lan WH, Chang MC, Lin SK, Hahn LJ, et al. Цитотоксичность фторида натрия на фибробластах слизистой оболочки полости рта человека и ее механизмы. Клеточный Биол Токсикол. 1998. Декабрь; 14( 6): 383– 9. [PubMed] [Google Scholar] 14.Камарго С.Е., Хояс Р.П., Сантана-Мело Г.Ф., Феррейра Л.Т., Эль Ачкар В.Н., Роде Сде М. Обычные и отбеливающие зубные пасты: цитотоксичность, генотоксичность и влияние на поверхность эмали. Эм Джей Дент. 2014. Декабрь; 27( 6): 307– 11. [PubMed] [Google Scholar] 15. Tsay HJ, Wang YH, Chen WL, Huang MY, Chen YH. Лечение бензоатом натрия приводит к уродству личинок рыбок данио. Нейротоксикол Тератол. 2007. сентябрь-октябрь; 29( 5): 562– 9. [PubMed] [Google Scholar] 16. Харви П.В., Эверетт Д.Дж. Значение обнаружения эфиров п-гидроксибензойной кислоты (парабенов) в опухолях молочной железы человека.J Appl Toxicol. 2004. январь-февраль; 24( 1): 1– 4. [PubMed] [Google Scholar] 17. Ng CT, Yong LQ, Hande MP, Ong CN, Yu LE, Bay BH и соавт. Наночастицы оксида цинка проявляют цитотоксичность и генотоксичность в ответ на окислительный стресс в фибробластах легких человека и Drosophila melanogaster. Int J Наномедицина. 2017. февраль 28; 12: 1621– 1637. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

          Цитотоксичность ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта на фибробластах десны человека

          Front Dent.2019 ноябрь-декабрь; 16(6): 450–457. Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран , Иран

          Фарзане Садеги Махунак

          2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

          Нафисе Асгари

          3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

          Зохре Моради

          1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

          2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

          1. Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

          2. Кафедра восстановительной стоматологии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

          3. Кафедра ортопедии, Школа стоматологии, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран

          * Автор, ответственный за переписку : Стоматологический исследовательский центр, Стоматологический научно-исследовательский институт, Тегеранский университет медицинских наук, Тегеран, Иран, электронная почта: [email protected]

          Поступила в редакцию 26 мая 2019 г.; Принято 1 сентября 2019 г.

          Авторское право © Стоматологический исследовательский центр Тегеранского университета медицинских наук. Эта работа опубликована в виде статьи с открытым доступом, распространяемой на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4). Некоммерческое использование работы разрешено при условии правильного цитирования оригинальной работы. Эта статья цитировалась другими статьями в PMC.

          Abstract

          Цели:

          Зубные пасты и жидкости для полоскания рта содержат ингредиенты, которые могут быть токсичными для тканей слизистой оболочки полости рта.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности ингредиентов часто используемых зубных паст и жидкостей для полоскания рта.

          Материалы и методы:

          Это экспериментальное исследование было проведено на 16 зубных пастах и ​​четырех ополаскивателях для полости рта, широко доступных на иранском рынке. Во-первых, была определена концентрация шести основных ингредиентов этих продуктов, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия. Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ) использовали для оценки цитотоксичности этих материалов в отношении фибробластов десны человека (HGF).Анализ МТТ проводили через 1, 15 и 30 минут после воздействия пяти концентраций каждого материала в трех экземплярах (в соответствии с концентрациями, полученными на этапе выделения). Данные анализировали с использованием трехфакторного дисперсионного анализа (ANOVA).

          Результаты:

          Разница в цитотоксичности материалов была статистически значимой (P<0,001). Цитотоксичность зависела от времени и концентрации; при увеличении концентрации материалов их цитотоксичность со временем увеличивалась.Цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина составляла >90%. Цитотоксичность NaF варьировала от 25% до 70%, а цитотоксичность всех концентраций лактата цинка и бензоата натрия составляла <50% для HGF.

          Заключение:

          Для снижения цитотоксического действия зубных паст лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин следует заменить более безопасными детергентами, а концентрацию фтора снизить до 400 частей на миллион (ppm). В качестве альтернативы фторид можно заменить другими антибактериальными и кариостатическими агентами.

          Ключевые слова: Тесты на цитотоксичность, иммунологические; Фторид натрия; додецилсульфат натрия; кокамидопропилбетаин; цинк; парабены; Бензоат натрия

          ВВЕДЕНИЕ

          Механическое удаление зубного налета является наиболее часто используемым методом поддержания гигиены полости рта и здоровья десен. Зубные пасты и жидкости для полоскания рта обычно используются в качестве дополнения к механическому удалению зубного налета [1].

          Здоровье полости рта существенно влияет на качество жизни. Таким образом, необходимость экономически эффективных, безопасных и эффективных мер гигиены полости рта была особо подчеркнута.Чистка зубов с использованием подходящей зубной пасты является наиболее эффективным методом укрепления здоровья полости рта, устранения биопленок и снижения риска развития гингивита [1].

          Зубные пасты обладают антибактериальными свойствами и уменьшают возникновение заболеваний, связанных с зубным налетом. Однако в них имеются добавки с возможным токсическим действием на слизистую оболочку полости рта [2, 3]. Зубные пасты содержат три основных ингредиента: фтор, абразивы и моющие средства [4]. Фтор добавляют в зубные пасты для придания им кариостатических свойств; однако он оказывает токсическое действие на все типы клеток.Эти эффекты различаются для разных типов клеток в зависимости от продолжительности воздействия и концентрации фтора. Сообщалось о некрозе как основном механизме гибели клеток после воздействия относительно высоких концентраций фтора [5]. Кроме того, воздействие высоких концентраций фтора [10 частей на миллион (млн) и выше] часто приводит к флюорозу, который характеризуется коричневатым изменением цвета эмали, приводящим к пятнистости эмали [6]. Абразивные вещества, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, также добавляют в зубные пасты для придания свойства удаления зубного налета.Бензоат натрия и парабены используются в качестве консервантов в зубных пастах [4].

          Моющие средства, присутствующие в составе зубных паст, включают лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин. Лаурилсульфат натрия показал значительные токсические эффекты in vitro [4]. Он может изменять белки слизистой оболочки полости рта in vitro [7] и увеличивать кровоток в деснах [8]. Лактат цинка является еще одним ингредиентом зубных паст с антимикробными свойствами [9]. В зубные пасты также добавляют десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции, которые могут оказывать токсическое действие [4].Например, парабен влияет на эндокринную систему и нарушает выработку гормонов. Он также канцерогенен [10]. Бензоат натрия может вызывать анафилактический шок, отек слизистой оболочки носа и одышку [10]. Лактат цинка также используется в составе зубных паст и может негативно влиять на дыхательную систему [10]. Кокамидопропилбетаин используется в составе зубных паст в качестве пенообразователя и может вызывать аллергические реакции [10].

          Предыдущие исследования теоретически показали токсичность этих материалов; однако не определена конкретная концентрация в качестве порога цитотоксичности этих агентов.Это исследование было направлено на оценку цитотоксичности основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта, обычно доступных на иранском рынке. Цитотоксичность различных ингредиентов сравнивали, чтобы найти материал с самой высокой цитотоксичностью.

          МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

          В этом экспериментальном исследовании in vitro использовались шестнадцать зубных паст, а именно Sanino kids (Evyap, Стамбул, Турция), Sehat (Sehat Co., Тегеран, Иран), Oral-B PRO-EXPERT (Procter & Gamble). Co., Цинциннати, Огайо, США), Crest 7 Complete (Procter & Gamble Co., Цинциннати, Огайо, США), Colgate (Colgate Palmolive Co., Пискатауэй, Нью-Джерси, США), Crend 3 (Pakrokh Cosmetic and Hygienic Co., Тегеран, Иран), Pooneh (Паксан, Тегеран, Иран), Parodontax GUM CARE ( GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Close Up (Юнилевер, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Nasim (Паксан, Тегеран, Иран), Sensodyne (GlaxoSmithKline, sro, Лондон, Великобритания), Bath (Iran Avandfar Co. Ltd. , Альборз, Иран), Signal (Unilever, Джерси-Сити, Нью-Джерси, США), Himalaya Complete Care (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия), Himalaya Sparkling White (Гималаи, Бангалор, Карнатака, Индия) и 4 средства для полоскания рта, а именно Irsha ( Shafa Cosmetic Laboratories Co., Тегеран, Иран), Oral-B (Grossgerau Co., Гессен, Германия), Vi-One (Rojn Cosmetic Lab. Co., Тебриз, Иран) и Listerine (Pfizer Inc., Моррис-Плейнс, Нью-Джерси, США). обычно доступные на иранском рынке, были оценены для определения концентрации шести основных ингредиентов в их составе, а именно фторида натрия (NaF), лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина, лактата цинка, парабена и бензоата натрия.

          Концентрацию NaF в составе зубных паст и ополаскивателей определяли методом потенциометрического титрования.

          Выделение лаурилсульфата натрия проводили с использованием активного анионного теста, основанного на стехиометрических реакциях между анионным поверхностно-активным веществом и стандартным раствором амина, приводящих к образованию родственного комплекса в органической фазе.

          Для измерения концентрации кокамидопропилбетаина использовали двухфазный (кислотно-основной) титрационный тест с лакмусовыми бумажками (индикаторная бумага Whatman, Camlab, Кембридж, Великобритания). Выделение парабенов из зубных паст и жидкостей для полоскания рта проводили с помощью газовой хроматографии (Shimadzu, Markham, Ontario, Canada).Лактат цинка и бензоат натрия выделяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ; серия Agilent Technologies 1200 Infinity, Санта-Клара, Калифорния, США). Помимо верхнего и нижнего пределов извлеченных концентраций шести ингредиентов, для оценки цитотоксичности каждого экспериментального материала использовали медиану, более высокую концентрацию и более низкую концентрацию (для большей точности).

          Клетки, использованные для теста на цитотоксичность:

          Клеточная линия HuGu фибробластов десны человека (HGF; Cell No.IBRC {«type»:»entrez-нуклеотид»,»attrs»:{«text»:»C10459″,»term_id»:»1535530″,»term_text»:»C10459″}}C10459), установленный из биопсии десны 45-летней женщины homo-sapien, были получены из банка клеток Иранского центра биологических ресурсов (IBRC). Культуральная среда состояла из модифицированной Дульбекко среды Игла (DMEM), 2 мМ L-глютамина и 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS). Среда для хранения включала 90 % FBS и 10 % диметилсульфоксида (ДМСО) в концентрации примерно 1×10. 6 клеток/флакон инкубировали при 37°C с 5% диоксидом углерода (CO 2 ).HGF прилипли ко дну культурального планшета. Таким образом, для отсоединения клеток использовали трипсин. В каждой лунке 96-луночного планшета требовалось 10 000 клеток на 100 мкл (около миллиона клеток).

          Анализ метилтиазолилтетразолия (МТТ):

          Анализ МТТ использовался для оценки цитотоксичности материалов. По сто мкл каждой клеточной суспензии добавляли в 96-луночный планшет и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажность от 12 до 24 часов для обеспечения прикрепления клеток.Затем в каждую лунку через указанный период добавляли чистые материалы (Merck, Rahway, NJ, USA) в соответствующих концентрациях плюс 10 мкл красителя МТТ. Три лунки, содержащие 100 мкл культуральной среды плюс 10 мкл МТТ, считали пустыми. Планшет накрывали алюминиевой фольгой и инкубировали при 37°С с 5% СО. 2 и 100% влажности в течение четырех часов. Наличие пурпурных отложений оценивали под инвертированным микроскопом. Затем из лунок удаляли культуральную среду (содержащую прикрепленные клетки) и в каждую лунку добавляли по 100 мкл ДМСО.Затем планшеты помещали в темноту на два-четыре часа и определяли оптическую плотность (ОП) лунок (как для экспериментальных, так и для пустых лунок) с помощью спектрофотометра (X-Rite, Гранд-Рапидс, Мичиган, США). на длине волны 570 нм. Результаты регистрировали для количественного сравнения пролиферации клеток. Все вышеперечисленные процедуры повторялись трижды. Это было сделано для всех шести ингредиентов в указанных концентрациях через 1, 15 и 30 минут после воздействия. Для этой цели использовали трехлуночные планшеты для трех повторов.Например, для материала с пятью концентрациями было выделено 15 лунок. Когда материал добавляли в лунку, фиксировали время и через минуту добавляли МТТ. Через одну минуту в каждую лунку добавляли 10 мкл МТТ в конечной концентрации 5 мг/мл. Остальные шаги были такими же, как упомянутые ранее. То же самое было сделано для оценок через 15 и 30 минут с той разницей, что МТТ добавляли в лунки через 15 и 30 минут после воздействия.

          Статистический анализ:

          Трехфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) использовали для оценки влияния времени, концентрации и типа ингредиента на цитотоксичность.Р<0,05 считалось статистически значимым.

          РЕЗУЛЬТАТЫ

          Концентрации экстрагированных ингредиентов, полученные с использованием соответствующих методов, были следующими (%: мг/100 мл дистиллированной воды):

            • NAF: 160-1400 PPM

            • Натрий Лаурилсульфат: 0,75-2,75%

            • Cocamidropyl Betaine: 1,5-4%

            • Зинк Лактат: 0,1-0,4%

            • Paraben: 0,01–0,1 %

            • Бензоат натрия: 0.1–0,3 %

            Концентрации, использованные для анализа МТТ, представлены в . Трехсторонний ANOVA показал значительную разницу в цитотоксичности парабена, лактата цинка и бензоата натрия (P<0,001). Кроме того, разница в цитотоксичности каждого материала через 1, 15 и 30 минут после воздействия была статистически значимой (P<0,001). Были отмечены значительные различия в цитотоксичности лаурилсульфата натрия, кокамидопропилбетаина и NaF во всех концентрациях через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

            Таблица 1:

            Концентрация шести ингредиентов, используемых для оценки цитотоксичности

            9 7
            Материалы Концентрации, используемые для оценки цитотоксичности
            Фторид натрия 1400 PPM 1400 1000 частей на миллион 400 частей на миллион 160 частей на миллион
            Лаурилсульфат натрия (%) 5.5 2 2.75 1.5 0.75 0.37
            Cocamidropopyl Betaine (%) 8 4 2 2 1.5 1
            0.6 0.6 0,2 0.2 0,1 0,05
            0,2 0.2 0,1 0,02 0,01 0.005
            натрия Бензоат (%) 0.6 0,3 0,15 0,1 0,03

            Результаты анализа МТТ для шести ингредиентов были следующими. , парабен и лактат цинка (P<0,001). Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую цитотоксичность, а парабен показал низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,0.001).

            Во всех трех временных точках лактат цинка показал высокую, а парабен — низкую цитотоксичность. Бензоат натрия показал цитотоксичность выше, чем у парабена, и меньше, чем у лактата цинка. Цитотоксичность NaF, лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина также значительно различалась через 1, 15 и 30 минут (P<0,001). Во всех трех временных точках наибольшую цитотоксичность показал лаурилсульфат натрия, а наименьшую цитотоксичность показал NaF.

            Бензоат натрия, парабен и лактат цинка имели самую низкую цитотоксичность во всех трех временных точках.Цитотоксичность всех трех ингредиентов во всех концентрациях составляла менее 50%. Другими словами, бензоат натрия, парабен и лактат цинка устраняют менее 50% HGF.

            Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин во все моменты времени приводили к элиминации значительного процента клеток и обладали самой высокой цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF.

            Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено в .бетаин во все моменты времени приводил к элиминации значительного процента клеток и обладал наибольшей цитотоксичностью. Порог цитотоксичности NaF в течение одной минуты составлял 400 частей на миллион, что означает, что при концентрации 400 частей на миллион NaF устраняет 50% HGF. Сравнение цитотоксичности различных концентраций шести основных ингредиентов в трех временных интервалах представлено на рис.

            Планка погрешности средних значений и 95% доверительный интервал (ДИ) среднего процента жизнеспособности клеток для различных концентраций исследуемых материалов через 1, 15 и 30 минут.

            ОБСУЖДЕНИЕ

            Все химические вещества, применяемые в ротовой полости, должны оцениваться с точки зрения цитотоксичности. Стоматологические материалы проходят различные испытания Американской стоматологической ассоциации (ADA), Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) и Международной организации по стандартизации (ISO). Один из основных тестов включает использование клеточной культуры для определения цитотоксического действия этих материалов. Тест МТТ основан на превращении бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия в кристаллы формазана жизнеспособными клетками.Поскольку в большинстве клеточных популяций общая митохондриальная активность зависит от количества жизнеспособных клеток, этот тест используют для оценки токсического действия лекарственных препаратов на клетки in vitro [2].

            Зубные пасты используются для ежедневного ухода за зубами; однако их влияние на клетки слизистой оболочки полости рта изучено недостаточно. Поскольку эти материалы находятся в непосредственном контакте со слизистой оболочкой, необходимо исследовать все их негативные эффекты [2]. В некоторых предыдущих исследованиях оценивалась цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта, а в некоторых из них сообщалось о токсичности зубных паст для клеток слизистой оболочки полости рта [2,4].

            Зубные пасты состоят из трех основных компонентов, включая (I) детергенты, такие как лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин, (II) нерастворимые абразивы для удаления зубного налета, такие как диоксид кремния, гидроксид алюминия и карбонат кальция, и (III) кариостатические агенты, такие как соединения фтора (NaF и монофторфосфат натрия). Лаурилсульфат натрия и кокамидопропилбетаин относятся к числу наиболее токсичных компонентов в составе зубных паст [2]. Другие вещества, добавляемые в зубные пасты для различных функций, включают десенсибилизаторы, средства против зубного налета, противовоспалительные средства, средства против запаха, консерванты, искусственные красители и эссенции; каждый из этих агентов может оказывать токсическое действие [4].В дополнение к зубным пастам лактат цинка, парабен и бензоат натрия также добавляют в качестве антимикробных агентов и пищевых консервантов. В некоторых исследованиях оценивалась канцерогенность этих материалов, особенно парабенов [11,12].

            Поскольку любой из ингредиентов зубной пасты может оказывать токсическое воздействие на клетки слизистой оболочки полости рта, и ни одно из предыдущих исследований не сравнивало цитотоксичность ингредиентов зубной пасты и жидкости для полоскания рта при их стандартных концентрациях, в этом исследовании оценивалась цитотоксичность шести основных ингредиентов зубных паст и жидкостей для полоскания рта по отношению к HGF, которые являются наиболее устойчивыми клетками к апоптозу и мутации.

            Cvikl et al. [4] оценили влияние ингредиентов зубной пасты на жизнеспособность клеток. Они оценили девять зубных паст с различными моющими средствами, подвергая HGF воздействию 1% концентрации этих зубных паст в течение двух минут. Они показали, что зубные пасты, содержащие лаурилсульфат натрия и фторид амина, сильно снижают жизнеспособность клеток, в то время как зубные пасты, содержащие кокамидопропилбетаин, оказывают меньшее влияние на жизнеспособность клеток [4]. Одним из недостатков цитируемого исследования было отсутствие внимания к времени как влиятельному фактору цитотоксичности, поскольку все тесты проводились через две минуты, и все материалы были признаны цитотоксичными.В нашем исследовании было обнаружено, что время оказывает значительное влияние на цитотоксичность, и цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина оценивали в трех временных точках и пяти концентрациях.

            В нашем исследовании цитотоксичность лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина была самой высокой, что сходно с результатами Cvikl et al [4]. Эти два детергента обладают высокой цитотоксичностью вскоре после воздействия и даже при концентрациях намного ниже безопасного порога для использования в зубных пастах.В нашем исследовании цитотоксичность кокамидопропилбетаина была несколько меньше, чем у лаурилсульфата натрия.

            Jeng et al. [13] оценили цитотоксичность NaF в отношении фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. Результаты показали, что NaF в концентрациях 4 ммоль/л (80 частей на миллион) и выше токсичен для фибробластов слизистой оболочки полости рта человека. NaF в концентрациях 4, 8 и 12 ммоль/л через два часа инкубации ингибировал активность митохондрий на 31, 56 и 57% соответственно [13].

            Их результаты отличались от наших.В настоящем исследовании цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем и увеличивалась со временем. Другими словами, концентрация NaF 1000 частей на миллион в течение одной минуты, 400 частей на миллион в течение 15 минут и 160 частей на миллион в течение 30 минут были нетоксичными, в то время как увеличение времени с одной минуты до 15 минут для концентрации 1000 частей на миллион и от От 15 до 30 минут для концентрации 400 частей на миллион повышали цитотоксичность в отношении HGF. Это может быть связано с разными методологиями.

            Torrado et al. [3] оценили цитотоксичность зубных паст Crest Extra Whitening и NMTD на фибробластах мыши с использованием анализа МТТ.Они сообщили, что ни одна из зубных паст не оказала существенного влияния на жизнеспособность клеток, а при увеличении времени инкубации значительно возрастала цитотоксичность [3].

            Все зубные пасты, включая Crest Extra Whitening, содержат значительное количество детергентов. В текущем исследовании было обнаружено, что даже самая низкая концентрация детергентов, используемых в зубных пастах, является цитотоксичной для HGF. Более того, эта цитотоксичность увеличивалась со временем. Основным недостатком исследования Torrado et al. [3] было то, что они оценивали цитотоксичность зубных паст с использованием мышиных фибробластов, что может быть причиной различий в результатах.

            Camargo et al. [14] сравнили цитотоксичность (анализ МТТ), оценили генетическую токсичность (путем наблюдения за изменениями в ядрах фибробластов хомяков) и оценили изменения шероховатости поверхности эмали, вызванные отбеливающими зубными пастами (Colgate и Oral- Б) и не отбеливающие зубные пасты. Цитотоксичность, генетическая токсичность и шероховатость поверхности, вызванные двумя отбеливающими зубными пастами, были выше, чем у других зубных паст. Также цитотоксичность Colgate Whitening была выше, чем у зубной пасты Oral-B [14].Их выводы относительно более высокой цитотоксичности отбеливающих средств по сравнению с не отбеливающими зубными пастами согласуются с нашими результатами. Отбеливающие зубные пасты содержат большее количество лаурилсульфата натрия, и, согласно нашим результатам, лаурилсульфат натрия обладает самой высокой цитотоксичностью среди шести основных ингредиентов зубных паст и отвечает за более высокую цитотоксичность отбеливающих зубных паст.

            Цай и др. [15] оценили влияние бензоата натрия на личинок одного типа рыб и сообщили, что концентрация бензоата натрия 2000 ppm была высокотоксичной для личинок; 1400-1500 ppm бензоата натрия вызывали гибель более 50% личинок.Они также показали, что бензоат натрия более токсичен для мышечных клеток и нейронов [15].

            Бензоат натрия используется в пищевых продуктах, косметике и средствах гигиены в качестве консерванта. Вышеупомянутое исследование выявило цитотоксичность концентрации бензоата натрия > 1400 ppm для мышечных клеток и нейронов, независимо от его безопасной концентрации для использования в пищевых продуктах, косметике и гигиенических продуктах [15]. Однако наши результаты показали, что бензоат натрия в стандартных концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не был токсичен для HGF.

            Харви и Эверетт [16] оценили роль парабенов в развитии рака молочной железы. Они обнаружили большое количество парабена в резецированных опухолевых тканях и заявили, что парабен может играть роль в увеличении частоты рака молочной железы [16].

            Отрицательное и канцерогенное воздействие консервантов, таких как парабены, в продуктах питания, косметике и средствах гигиены ранее было задокументировано. Эти эффекты в основном обусловлены длительным (в течение многих лет) контактом с веществами, содержащими парабен, и его накопительным действием, что в конечном итоге вызывает рак у человека [16].

            В текущем исследовании парабены в концентрациях, используемых в зубных пастах и ​​ополаскивателях для рта, не оказывали токсического действия на HGF через 1, 15 и 30 минут. Однако необходимы дальнейшие исследования неблагоприятных системных эффектов и канцерогенеза других концентраций парабенов при более длительном воздействии. Нг и др. [17] оценили цитотоксичность и генетическую токсичность оксида цинка для фибробластов легких человека и плодовой мухи in vitro и in vivo. Они заметили, что оксид цинка вызывает гибель фибробластов легких человека.Более того, окислительный стресс вызвал повреждение ДНК в этих клетках. Оксид цинка значительно увеличивал смертность дрозофил в период их развития от вылупления до половозрелости [17].

            В текущем исследовании цитотоксичность лактата цинка оценивалась вместо оксида цинка из-за важной роли лактата цинка и его антибактериальной активности в зубных пастах. В исследовании Ng et al. [17] не учитывалась концентрация оксида цинка или время воздействия при оценке токсичности.Кроме того, несмотря на очень схожую химическую активность и токсическое действие оксида цинка и лактата цинка, цитотоксические эффекты оксида цинка, о которых сообщалось в цитируемом исследовании, были намного выше, чем у лактата цинка в нашем исследовании, что может быть связано с тем, что они не учитывали концентрация вещества и продолжительность воздействия. Кроме того, в двух исследованиях оценивали различные типы клеток (фибробласты легких человека по сравнению с HGF).

            ЗАКЛЮЧЕНИЕ

            В рамках ограничений данного исследования можно сделать следующие выводы:

            1. Цитотоксичность NaF при концентрации 1400 частей на миллион (максимальная концентрация, используемая в зубных пастах) через одну минуту составила 53%, тогда как его цитотоксичность при концентрации 160 частей на миллион (минимальная концентрация, используемая в зубных пастах и ​​ополаскивателях) составляла 25%.Цитотоксичность NaF имела значительную корреляцию со временем; через 30 минут цитотоксичность концентрации NaF 160 ppm увеличилась до 50%. Самая высокая цитотоксичность NaF составила 71% (1400 ppm за 30 минут).

            2. Порог концентрации фтора 400 ppm; он не был токсичен для HGF через 1, 15 и 30 минут воздействия.

            3. Лаурилсульфат натрия обладал самой высокой цитотоксичностью во всех временных точках и показал >90% токсичности при всех концентрациях.

            4. Кокамидопропилбетаин обладает цитотоксичностью от 85% до 97%. Обладал самой высокой цитотоксичностью после лаурилсульфата натрия. Его цитотоксичность имела значительную корреляцию со временем и концентрацией; при увеличении концентрации и времени цитотоксичность возрастала.

            5. При увеличении концентрации лаурилсульфата натрия и кокамидопропилбетаина цитотоксичность зубных паст и жидкостей для полоскания рта повышалась.

            6. Бензоат натрия и парабен показали самую низкую цитотоксичность.Кроме того, 0,6% концентрация бензоата натрия через 30 минут (30% цитотоксичность) и 0,2% концентрация парабена через 30 минут (40% цитотоксичность) показали самую высокую цитотоксичность.

            БЛАГОДАРНОСТЬ

            Мы хотели бы выразить нашу огромную признательность доктору Пуяну Аминишакиб, доценту кафедры оральной и челюстно-лицевой патологии Школы стоматологии Тегеранского университета медицинских наук.

            Сноски

            ЗАЯВЛЕНИЕ О КОНФЛИКТЕ ИНТЕРЕСОВ

            Не заявлено

            ССЫЛКИ

            1.Бинни А., Адди М., Ньюкомб Р.Г. Эффекты удаления зубного налета при однократном полоскании и чистке щеткой. J Пародонтол. 1993. Март; 64( 3): 181– 5. [PubMed] [Google Scholar]2. Гапанчи Дж., Камали Ф., Моаттари А., Пуршахиди С., Шахин Э., Резазаде Ф. и др. Сравнение in vitro цитотоксического и антибактериального действия 16 коммерческих зубных паст. J Int Здоровье полости рта. 2015. Март; 7( 3): 39– 43. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]3. Торрадо А., Валиенте М., Чжан В., Ли Ю., Муньос К.А. Цитотоксичность новой зубной пасты на основе смеси ионообменных смол.Эм Джей Дент. 2005. Август; 18( 4): 267– 9. [PubMed] [Google Scholar]4. Цвикл Б., Лусси А., Грубер Р. Влияние экстрактов зубной пасты in vitro на жизнеспособность клеток. Eur J Oral Sci. 2015. Июнь; 123( 3): 179– 85. [PubMed] [Google Scholar]5. Барбье О., Арреола-Мендоса Л., Дель Разо Л.М. Молекулярные механизмы фторидной токсичности. Химическое биологическое взаимодействие. 2010. ноябрь 5; 188( 2): 319– 33. [PubMed] [Google Scholar]6. Риттер А.В., Эйдсон Р.С., Донован Т.Е. Кариес зубов: этиология, клинические характеристики, оценка риска и лечение.В: Хейманн Х.О., Свифт Э.Дж., Риттер А.В. (редакторы). Стердеванта «Искусство и наука оперативной стоматологии». Эльзевир/Мосби, Сент-Луис, Миссури, 2013: 41– 88. [Google Академия]7. Хили К.М., Крачли А.Т., Торнхилл М.Х., Уильямс Д.М. Влияние лаурилсульфата натрия, триклозана и цинка на проницаемость нормальной слизистой оболочки полости рта. Оральный Дис. 2000. Март; 6( 2): 118– 23. [PubMed] [Google Scholar]8. Херлофсон Б.Б., Бродин П., Аарс Х. Увеличение кровотока в деснах человека, вызванное лаурилсульфатом натрия. Дж. Клин Пародонтол.1996. ноябрь; 23( 11): 1004– 7. [PubMed] [Google Scholar]9. Харасти В.И., Замбон Дж.Дж., Шринивасан П.К. Оценка противомикробной активности средств для ухода за зубами на бактериях ротовой полости человека. Джей Клин Дент. 2010 г.; 21( 4): 96– 100. [PubMed] [Google Scholar] 10. Новак К, Ратайчак-Врона В, Гурска М, Яблонска Э. Парабены и их влияние на эндокринную систему. Мол Селл Эндокринол. 2018. Октябрь 15; 474: 238– 251. [PubMed] [Google Scholar] 11. Наир Б. Заключительный отчет по оценке безопасности бензилового спирта, бензойной кислоты и бензоата натрия.Int J Toxicol. 2001 г.; 20 Приложение 3: 23– 50. [PubMed] [Google Scholar] 12. Park YD, Jang JH, Park JE, Kim JH, Kim EC, Song YJ и др. Анализ парабенов в средствах для ухода за зубами и полости рта. Биомед Хроматогр. 2014. Декабрь; 28( 12): 1692– 700. [PubMed] [Google Scholar] 13. Jeng JH, Hsieh CC, Lan WH, Chang MC, Lin SK, Hahn LJ, et al. Цитотоксичность фторида натрия на фибробластах слизистой оболочки полости рта человека и ее механизмы. Клеточный Биол Токсикол. 1998. Декабрь; 14( 6): 383– 9. [PubMed] [Google Scholar] 14.Камарго С.Е., Хояс Р.П., Сантана-Мело Г.Ф., Феррейра Л.Т., Эль Ачкар В.Н., Роде Сде М. Обычные и отбеливающие зубные пасты: цитотоксичность, генотоксичность и влияние на поверхность эмали. Эм Джей Дент. 2014. Декабрь; 27( 6): 307– 11. [PubMed] [Google Scholar] 15. Tsay HJ, Wang YH, Chen WL, Huang MY, Chen YH. Лечение бензоатом натрия приводит к уродству личинок рыбок данио. Нейротоксикол Тератол. 2007. сентябрь-октябрь; 29( 5): 562– 9. [PubMed] [Google Scholar] 16. Харви П.В., Эверетт Д.Дж. Значение обнаружения эфиров п-гидроксибензойной кислоты (парабенов) в опухолях молочной железы человека.J Appl Toxicol. 2004. январь-февраль; 24( 1): 1– 4. [PubMed] [Google Scholar] 17. Ng CT, Yong LQ, Hande MP, Ong CN, Yu LE, Bay BH и соавт. Наночастицы оксида цинка проявляют цитотоксичность и генотоксичность в ответ на окислительный стресс в фибробластах легких человека и Drosophila melanogaster. Int J Наномедицина. 2017. февраль 28; 12: 1621– 1637. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

            Что в вашей зубной пасте? Проверка ингредиентов.

            Когда вы в последний раз читали список ингредиентов вашей любимой марки зубной пасты? Вообще-то, вы когда-нибудь читали список ингредиентов? Если вы похожи на большинство американцев, то за последние несколько лет вы стали сумасшедшим, читающим список ингредиентов, и было бы разумно добавить этикетку зубной пасты в свой список материалов для чтения.Итак, давайте рассмотрим наиболее распространенные ингредиенты, узнаем немного о том, как они работают, и поможем вам сделать личный выбор, избегать их или нет.

            Из всех ингредиентов, входящих в состав зубной пасты, если и есть тот, с которым вы, возможно, знакомы, то это, скорее всего, лаурилсульфат натрия. Он используется в зубной пасте в основном в качестве пенообразователя, чтобы вы чувствовали, что ваша чистка оказывает должное воздействие. Некоторые утверждают, что это ненужный ингредиент, учитывая, что у некоторых он склонен раздражать ткани полости рта и может способствовать образованию афтозных язв.Однако более сомнительным является утверждение, что SLS является канцерогеном. И хотя Американское онкологическое общество и федеральное правительство не считают SLS канцерогеном, некоторые ученые считают, что необходимы дополнительные испытания и что потребители должны по возможности избегать этого ингредиента. Если вас это вообще беспокоит, решение избегать SLS остается за вами — не все зубные пасты содержат этот ингредиент.

            Ароматизаторы

            Сделать зубную пасту вкусной — непростая задача. И поверьте нам, вы хотите, чтобы это было вкусно! Вкусовые добавки часто представляют собой масла/экстракты/ароматизаторы, такие как корица, анис и мята, но могут быть и синтетическими (например, аспартам).) Большинство предпочли бы натуральный ароматизатор, но признайте, что у некоторых людей эти добавки могут вызывать раздражение тканей полости рта, а мята для некоторых вызывает изжогу. Если вы подозреваете, что ваша зубная паста является причиной любого раздражения во рту, которое вы можете испытывать, поэкспериментируйте с зубными пастами с разными вкусами, пока не найдете то, что лучше всего подходит для вас.

            Совсем не обязательно иметь цветную зубную пасту. Итак, если вы хотите избежать таких вещей, как цвета, за которыми следуют числа, такие как синий № 2, просто скажите «нет» дополнительным цветам.Они также могут быть раздражителями для некоторых людей.
            Фтор! Вам это нужно, вы этого хотите. Убедитесь, что он есть в вашей зубной пасте. Фтор укрепляет зубную эмаль и делает зубы более устойчивыми к кислотным воздействиям зубного налета, бактерий и сахара во рту. Некоторым из нас может даже потребоваться добавка фтора. Алкоголь высушивает ваш рот, и ваш рот не очень наслаждается этим ощущением. Это может способствовать развитию гингивита и, как правило, не оставляет ощущения свежести, как хотелось бы. Итак, зачем использовать зубную пасту со спиртом?
            Решение по триклозану еще не принято.Его содержит только Colgate Total, и он используется (очень эффективно) в качестве антибактериального средства для борьбы с гингивитом. Некоторые исследователи, однако, утверждают, что он нуждается в более поздних и продолжительных исследованиях, учитывая его сомнительную связь с раком. Измерение риска и пользы всегда зависит от вас. Вот что некоторые представители научного сообщества говорят о триклозане.
            Силикагель, наряду с пищевой содой, карбонатом кальция, фосфатами кальция и глиноземом, являются абразивными агентами, используемыми для удаления пятен с зубов.Если вы часто пьете кофе, чай, красное вино или газированные напитки, вам может понадобиться чистить зубы зубной пастой, содержащей эти ингредиенты. Признайте, однако, что они являются абразивными для ваших зубов. Используйте зубную пасту с низким рейтингом абразивности. Или уменьшите количество продуктов и напитков, вызывающих появление пятен. Кроме того, мы предполагаем, что вы не курите, что действительно окрашивает зубы!
            Для поддержания зубной пасты влажной и в хорошей форме требуется увлажнитель. В противном случае вы получите твердый блок зубной пасты или меловую массу.Глицерин, сорбит и вода являются наиболее распространенными добавками к вашей зубной пасте для выполнения этой работы, и в последнее время появился чудо-ингредиент ксилит, потому что он не только обеспечивает влажность, но и помогает бороться с кариесом.
            Каррагинан, целлюлозная камедь, гуаровая камедь, ксантановая камедь и даже глютен помогают загустить зубную пасту. Как правило, это безвредные ингредиенты, но если у вас глютеновая болезнь или вас беспокоит глютен, вам стоит ознакомиться с этим списком безглютеновых зубных паст.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.